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目的 肾盂输尿管交界部梗阻（ureteropelvic junction obstmction，UPJO）指的是尿液从肾盂到输尿管的排出障碍。UPJO的病因分为3大类：本身的、外部的，和继发的。本文主要讨论的是本身原因所致的UPJO。通过研究UPJO导致肾积水的病例，人们发现肾盂平滑肌蠕动机制的紊乱可以导致UPJO的发生。从组织学上看，肾盂输尿管交界部（ureteropelvic junction，UPJ）正常存在的环行肌束被异常的纵行肌束或纤维组织取代。目前不清楚上述改变是扩张的原因还是继发的变化。但是普遍认为这种改变并非梗阻导致积水的唯一原因。影响肾盂平滑肌蠕动的因素很多，主要有肌源性，神经源性两大类。神经源性因素起着重要的调节作用。有前人文献可知，UPJ存在起抑制作用的β-肾上腺素受体（β-adrenergic receptor，β-AR）。应用β-AR激动剂，可以降低UPJ平滑肌的蠕动频率。目前关于β-AR在正常及肾积水UPJ平滑肌的分布的研究较少。本实验检测β-AR在UPJ部位的分布以及其在正常、UPJO病例UPJ上的含量差异，分析β-AR含量与UPJO发病的关系，对于UPJO发病机制的研究具有重要的理论和实际意义。 材料与方法 1．材料 本实验所用标本为2002年—2003年本院经手术切除的肾癌患者的UPJ组织15例；肾积水做成形术或切除术的UPJ组织32例。由两位资深病理医师确认，资料完整。快速将UPJ组织切取下来，立即用预冷PBS冲洗血细胞，去除坏死组织，半小时内送至-70℃冰箱冻存。本组病例男31例；女16例。年龄14岁～73岁，平均45.36岁。左侧UPJ30例，右侧17例。正常UPJ15例，取自肾癌病例；肾积水UPJ总计32例，其中本身原因所致UPJO病例20例，其他原因所致梗阻12例。 2．主要试剂和来源 实验药品：兔抗人β-AR多克隆抗体（β1AR、β2AR），羊抗人β-AR多克隆抗体（日3 AR）向美国Santa Cruz公司购买;S一P超敏试剂盒（KIT一9701）和DAB酶底物显色试剂盒（DAB一0031）均购自北京中山生物技术开发公司。（2）Westem Blotting:浓缩型抗体同上，碱性磷酸酶标记的羊抗兔I舀二抗和NBT/BCIP染色试剂盒（NBS821 12）均购自华美生物工程公司。 3.方法 3.1免疫组织化学检测按链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶（S一P）法试剂盒说明书步骤进行结果以细胞膜和/或细胞浆中出现棕黄色颗粒为汗AR阳性显色，以染色强度和阳性细胞比例评定阳性表达。光镜下在每张肾积水UPJ切片中随机选取5个高倍视野，每个视野计数200个细胞。染色强度分级如下:无着色为O，黄色及更深颜色为l;阳性细胞数分级为:阳性细胞数‘10%为O，>10%为l。两项得分相乘结果为1者为阳性表达组织。 3·2 WestemBlot血g:取新鲜肾盂UPJ组织，用胰酶处理后，以镊子轻轻分离至只余平滑肌层，提取新鲜肾盂平滑肌组织加人裂解缓冲液，剪碎，匀浆，低温超速离心（4℃，13000转/分，30分钟），提取上清即为细胞总蛋白。测定蛋白浓度后调定至等浓度200记，电泳转印，封闭，加相应的一抗、二抗及显色试剂检测。实验结果用灰度值测定。 4.统计学分析 采用SPSS 1 0.0统计分析软件，对p一AR表达与临床病理因素的关系用T检验和方差分析，P<0.05为有意义。结果 1.按分侧、病因等分组，计:按分侧:左侧30例（63.83%），右侧17例（36.17%）。按病因分为3组:分别为正常UPJ巧例（31.91%），本身UPJO所致肾积水20例（42.55%），其他原因所致肾积水12例（25.54%）。 2.全部47例进行免疫组化实验，p1AR在正常UPJ平滑肌，肾积水UPJ平滑肌为阴性表达。 3.日ZAR在正常肾盂平滑肌，肾积水肾盂平滑肌为阳性表达。 4.日3AR在正常肾盂平滑肌，肾积水肾盂平滑肌为阳性表达。 5. pZAR、p3AR与分侧的关系 统计westem blotting实验中，pZAR、日3AR的含量左侧与右侧UPJ间的差异无统计学意义。P值均大于0.05，可以认为pZAR、p3AR在UPJ的含量与分侧无关。 6. pZAR、p3AR与病因的关系 病因不同，pZAR、p3AR的含量明显不同。在westem blouing实验中，pZAR的含量在3组间比较，差异有统计学意义。两两比较可知，在本身原因组与正常UPJ组及非本身原因组间差异均有统计学意义。p3 AR在3组间比较，p>0.05，差异无统计学意义。将本身原因组与其他原因组合并为肾积水组与正常组比较p3 AR灰度值显著升高，P<0.05，但在本身原因组与非本身原因组间的差异无统计学意义。)结论 目前，关于UPJO的病因、发病机制不清。在正常UPJ及UPJO的UPJ部位的日一AR的不同亚型的含量差异国内外未见报道。通过本实验得出以下结论:（l）在UPJ部位，存在pZAR、p3AR;（2）pZAR在本身原因所致的uPJO中可能有一定的作用;（3）日3 AR在肾积水的发病过程中可能有一定的作用。 鉴于研究经费所限，本实验未能进行关于日一AR各个亚型在UPJ的药理学效应，与CS、G，蛋白关系、腺昔酸环化酶活性，cAMP含量等相关实验，对于肾盂压力与日一AR各个亚型的关系有待于今后进一步研究。