可注射猪小肠粘膜下组织修复兔跟腱的实验研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shengli46
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目的:本实验通过应用猪小肠粘膜下组织(Smallintestinal submucosa,简称SIS)匀浆,注射至兔的跟腱缺损部位;观察其替代、再生的过程,探讨应用可注射SIS治疗组织缺损可行性的客观依据,以便为临床上组织缺损的修复,尤其是关节镜下组织修复的开展提供充足客观的依据.材料与方法:SIS的制备:取经过检疫的宰杀后10分钟内的健康成年猪的空肠,用清水洗干净后,翻转小肠,使其黏膜面向外,用手术刀柄将黏膜层清除,再翻转小肠,用同样的方法清除浆膜层和肌层组织.洗净小肠黏膜下组织,完全去除小肠黏膜下层上的残留组织.然后将其浸泡于0.1%过氧乙酸液中(20-30分钟),然后用中性PH缓冲盐溶液冲洗以及蒸馏水进行去细胞化处理,.所保留的基质具有复杂的结构和分子功能如Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ型胶原,蛋白多糖,糖蛋白,以及各种生长因子.将制备的SIS浸泡于抗菌素盐水中冰点保存.以每10CM的SIS段加3ML无菌生理盐水的比例在无菌情况下,以匀浆器将其制备成可以用18号针头注射的匀浆.最后将匀浆给予2.5mRad gamma射线照射;而制备一种无菌、无致热源的生物材料.麻醉,消毒、铺单,取一侧为手术侧,跟腱外侧切口暴露跟腱后束.于中间部位切断,待其自然回缩后缝合固定两断端,使其固定存在一个缺损间隙,缺损大小4mm±1mm;缝补肌腱外膜切口,缝合皮肤切口.用注射器以18号针头,经切口旁穿刺致跟腱断裂处注入1毫升SIS匀浆,术后不作下肢石膏固定.对照侧同样手术切断跟腱后束,使用实验侧同样的技术形成缺损待其自然愈合.并分别于术后1、2、4、8、12周处死动物,进行大体观察;切取重建区组织,固定、HE染色、天狼猩红染色,光镜下观察各组标本的病理改变,对重建后的各期跟腱进行力学拉伸实验,所有数据采用SPSS10.0统计软包进行统计学检测,P<0.05有显著性差异.以及对跟腱修复组织进行电镜观察.
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