基于纳米材料的生物传感平台对呼吸疾病相关生物标志物的检测及应用研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ljsamuel
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疾病生物标志物是一种可客观测量和评估的生物学指标,不仅用于早期筛查和诊断疾病,而且还可预测疾病的进展、监测药物干预的治疗过程。理想的生物标志物都具有特异性高、稳定性好和微创等优点,这些优点使其在疾病诊断中脱颖而出。众所周知,最常见的疾病是呼吸系统相关性疾病,其生物标志物的异常表达与肺损伤有极大的联系,因此寻找理想的疾病标志物至关重要,不仅可提高确诊率、而且可尽早给予药物个体化治疗。近年来,电化学生物传感器因其快速、灵敏、便捷和经济等特点,广泛应用于疾病标志物检测和疾病诊断。基于此,本研究设计了miRNA生物传感器和适体传感器对呼吸系统重要疾病(特发性肺纤维化和结核)相关生物标志物(miRNA和ESAT-6抗原)进行定量检测和分析,具体的研究内容如下:1.基于功能化富勒烯和金属有机框架的纳米杂化物检测人血清的miR-3675-3p。首先,富勒烯(C60)掺杂至聚酰胺-胺功能化的金属有机框架(PAMAM-MOF)合成一种新的纳米复合物(C60@PAMAM-MOF),该复合物最大的优点是具有优异的氧化还原活性(C60@PAMAM-MOF>NC60@PAMAM-MOF>C60@PAMAM);其次,修饰有核@壳纳米粒子(Au@Pt NPs)的乙炔黑(AB)作为传感界面进一步放大信号;最后,miRNA传感器结果显示在10 fM~10 nM呈线性关系,检测限为2.99fM。更重要的是,该方法相比于qRT-PCR具有更适宜的检测性能,说明该方法为IPF的诊断提供了新途径。2.基于聚苯胺掺杂的MXene-AB纳米复合物耦合3D NML@N-CNTs纳米花的同源适体传感器检测结核ESAT-6抗原的分析研究。首先,PANI掺杂至MXene-AB合成了多层状MXene-AB-PANI纳米复合物,不仅增强导电性而且能负载更多的金纳米粒子和适体链Ⅱ(EBA Ⅱ)形成信号标记物;其次,N-CNTs静电吸附于花状镍锰双氢化物(NiMn LDH,NML)中成功合成了具有强导电性的3D NML@N-CNTs纳米花,不仅展示了杰出的分散性而且特殊的结构增加了适体 Ⅰ的量。最后,ESAT-6抗原夹心于MXene-AB-PANI-AuNPs-EBA Ⅱ和固定在电极表面的EBA Ⅰ,产生可检测的电信号定量检测ESAT-6,在10 fg/mL~100 ng/mL之间呈线性。更重要的是,制备的传感器具有良好的特异性和稳定性,且在临床血清检测中获得了满意的结果。
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