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目的:肾细胞癌(RCC)是第三大常见的泌尿系统恶性肿瘤,占所有成人恶性肿瘤的2~3%,虽然多学科综合治疗的治疗发病率有所下降,但晚期癌症的预后仍然较差,5年生存率为5~10%。并且目前关于肾癌的发生、发展的分子机制尚未完全明确。微小RNA(miRNAs)是一类小分子非编码RNA,作为近期的研究热点之一,其已被证实在多种人类恶性肿瘤的生物学进程中发挥重要的调控作用。miRNA显示与30%至60%的蛋白质编码基因的调节相关,并且在肾细胞癌中充当癌基因或抗癌基因。随着研究的深入,miRNA可能成为肾癌的诊断,治疗和预后相关的生物标志物。有报道指出miR-572是高度保守的miRNA,在白血病、鼻咽癌、卵巢癌、基底细胞癌等多种肿瘤中表达异常,并可通过对细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡等功能的调控而参与肿瘤的发生发展的进程。然而目前miR-572在肾癌中的功能及作用的分子机制尚未明确,亦未有相关研究证实。因此本课题研究通过在肾癌组织中检测miR-572的表达,通过体外细胞实验探究其功能,以及结合临床肾癌患者术后随访资料分析,进一步探索其作为肾癌生物标记物应用于临床的可能性。方法:前期实验通过基因芯片研究结果,筛选出肾癌组织中高表达的miR-572,通过RT-qPCR方法检测其在52对肾癌及癌旁正常组织中的表达。采用四格表行?~2检验探究miR-572表达水平与患者临床特征之间的关系。为探究其功能,在肾癌细胞(786-O和ACHN)转染miR-572功能类似物或抑制剂以过表达或敲低其表达,通过划痕实验将miR-572对肾癌细胞迁移的影响进行验证,通过CCK-8实验对肾癌细胞增殖作用的影响进行验证,Transwell实验对肾癌细胞迁移和侵袭作用的影响进行验证,流式细胞术对肾癌细胞凋亡的影响进行验证。另外对42例具有完整随访资料以及完整石蜡标本的肾癌患者对其石蜡标本进行提取RNA,通过RT-qPCR方法检测其miR-572的表达水平,验证miR-572的表达水平与肾癌患者的预后之间的关联,评估miR-572的表达水平对肾癌患者的预后价值。结果:RT-qPCR结果显示52对肾癌组织及癌旁正常组织中,有39对(75%)组织中miR-572表达上调,肾癌组织中的miR-572相对表达量为癌旁正常组织的5.515±0.263倍,这提示肾癌组织中的miR-572的表达量明显高于癌旁正常组织(p<0.001)。然而miR-572的表达水平与患者临床特征之间无明显差异(P>0.05),未见明显相关性。miR-572在肾癌细胞系(786-O、ACHN、Caki-1)中的表达较正常细胞系(293T)高,其相对293T细胞系(1.000±0.265)表达量的关系是786-O(8.084±0.618,P<0.001),ACHN(9.372±1.371,P<0.001)和Caki-1(4.643±0.793,P<0.01))。这些结果表明miR-572在肾癌组织中上调并且可能在肾癌中起致癌基因的作用。细胞功能实验结果中,与阴性对照组相比,划痕实验结果表明过表达miR-572可促进肾癌细胞迁移,敲低表达则抑制细胞迁移;CCK-8实验结果表明过表达miR-572可促进肾癌细胞增殖,敲低则抑制细胞增殖;Transwell实验表明过表达可促进肾癌细胞迁移和侵袭,敲低则抑制细胞迁移和侵袭;流式细胞术实验表明过表达可抑制肾癌细胞凋亡,敲低则促进细胞凋亡。分析42组肾癌石蜡标本中miR-572的表达水平与患者的术后总生存时间,Kaplan-Meier生存曲线的数据表明,miR-572低表达的患者具有显着更长的总生存期(P=0.019),在Cox比例风险回归分析的生存曲线中,单变量分析表明miR-572的表达水平与总存活率呈负相关(HR=0.195,95%CI=0.042-0.903,P=0.037),在控制性别,年龄,肿瘤大小和肿瘤分期后的多变量分析中,miR-572的表达水平与总存活率亦呈负相关(HR=0.174,95%CI=0.034-0.878,P=0.034)。这些结果表明miR-572可作为肾癌的潜在独立预后标志物。结论:miR-572在肾癌组织以及肾癌细胞系中显著高表达,上调miR-572可促进肾癌细胞系786-O以及ACHN的迁移、侵袭和增殖能力,并抑制其凋亡,而下调miR-572则抑制肾癌细胞系786-O以及ACHN的迁移、侵袭和增殖,并促进其凋亡。在Kaplan-Meier生存曲线以及Cox比例风险回归分析中单变量和多变量分析的结果表明,miR-572低表达的患者具有显着更长的总体存活。以上结果表明,miR-572在肾癌组织中异常表达,发挥着促癌基因的作用,并参与调控肾癌细胞的生物学功能,有望成为肾癌早期诊断、治疗以及预后的标志物。