亨廷顿蛋白相关蛋白1(Huntingtin-associated protein 1，HAP1)是一种功能未明的蛋白，HAP1至少具有HAP1A和HAP1B两种同工异构型。早期研究认为，HAP1主要表达于神经系统。本实验室以前的研究发现，在大鼠内分泌系统，HAP1也可选择性地表达于包括胰岛内分泌细胞在内的分泌含氮类激素的内分泌细胞中。越来越多的研究显示，HAP1参与细胞内物质转运。本实验室最近的研究发现，HAP1参与调节胰岛β-细胞的胰岛素分泌。为了进一步证明HAP1在细胞内物质转运中的作用，本研究应用胰岛瘤细胞INS-1细胞，观察了沉默HAP1对 INS-1细胞钠通道的影响。　　 一.HAP1INS-1细胞的表　　 免疫荧光染色显示，HAP1在INS-1细胞表达水平较高，HAP1免疫反应产物弥散均匀分布在细胞胞质和突起内。应用免疫印迹，可在INS-1细胞中检测到大小不同的两种蛋白质，其大小与大鼠下丘脑内的HAP1A和HAP1B一样，分别为85kD和75kD。当用HAP1-SiRNA转染细胞后，免疫荧光和免疫印迹检测均显示HAP1的表达水平明显降低。　　 二、沉默HAP1对INS-1细胞钠通道的影响　　 为了探讨HAP1调节胰岛β-细胞胰岛素分泌的可能机制，应用膜片钳技术观察了沉默HAP1对INS-1细胞钠通道的影响。在膜片钳的电流钳工作模式下，可在INS-1细胞记录到动作电位；在膜片钳电压钳工作模式下，可在INS-1细胞记录到相应的综合电流，包括内向Na+电流、Ca2+电流和外向电流K+电流；在钠通道电压钳工作模式下，可在INS-1细胞记录到Na+电流，而在钠通道特异性阻断剂河豚毒素(TTX)存在时，Na+电流明显减小。当用HAP1-SiRNA沉默HAP1后，INS-1细胞动作电位中的峰电位明显降低甚至消失，钠电流大小和电流密度值均明显降低。以上结果表明，INS-1细胞表达HAP1，其所表达的HAP1与脑中表达的HAP1具有相同的分子特性，INS-1细胞可作为研究HAP1对钠通道调控作用的合适细胞模型；HAP1在细胞内物质转运中的作用及沉默HAP1后对INS-1细胞钠通道电生理学的影响提示，HAP1可能通过影响钠通道蛋白的细胞内转运而影响胰岛β-细胞胰岛素的分泌。