甘草酸二铵对急性肺损伤大鼠糖皮质激素受体及高迁移率族蛋白1表达的影响

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目的观察甘草酸二铵(GL)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核因子κB(NF-κB)、糖皮质激素受体(GR)表达的调控作用及对血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)表达的影响。方法将54只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、ALI模型组、GL干预组、地塞米松干预组、ALI受体阻断组和GL干预受体阻断组。各组动物造成失血性休克,ALI模型组、GL干预组和地塞米松干预组分别给予内毒素(LPS)2mg/kg腹腔注射;LPS注射前1h,GL干预组和地塞米松干预组分别给予GL 20mg/kg或地塞米松2mg/kg腹腔注射。ALI受体阻断组和GL干预受体阻断组则在内毒素注射前1h按20mg/kg肌肉注射受体阻断剂RU486。观察6h后各组大鼠肺组织病理,测定肺湿干比(W/D)、Pa02,并采用逆转录-PCR反应检测肺组织NF-κB mRNA、GR mRNA的表达,western blot法测定肺组织NF-κB及GR蛋白的表达,ELISA法测定血清TNF-α、IL-10浓度,免疫组化法检测肺组织NF-κB、TNF-α、IL-10的表达。采用SPSS 13.0软件进行统计学分析,各组间均数比较采用单因素方差分析,均数两两比较采用q检验。结果(1) ALI模型组TNF-α为(153.67±20.44)ng/L ,明显高于假手术组[(43.98±7.52)ng/L]( q=27.68, p<0.01 )、HLGR组[(102.53±8.41)ng/L](q=12.36,p<0.01)和GL干预组[(87.20±7.55)ng/L](q=17.33,p<0.01)。ALI模型组IL-10为(42.45±6.85)ng/L ,明显高于假手术组[(24.75±8.04)ng/L](q=7.15,p<0.01),但低于GL干预组[(58.30±9.65)ng/L](q=6.13,p<0.05)和HLGR组[(56.88±5.36)ng/L](q=5.76,p<0.05)。(2) ALI模型组NF-κB mRNA和蛋白的表达水平[分别为(3.418±0.527)和(277.7±22.1)]明显高于假手术组[分别为(0.437±0.087)和(45.7±7.2)](q值分别为26.56和77.35,均p<0.01),而GR mRNA和蛋白的表达[分别为(0.157±0.029)和(13.5±2.3)]则明显低于假手术组[分别为(0.434±0.014)和(56.6±6.3)](q值分别为7.78和31.27,均p<0.01);GL干预组NF-κB mRNA和蛋白的表达水平[分别为(1.892±0.277)和(110.3±11.5)]明显低于ALI模型组(q值分别为14.16和44.19,均p<0.01),GR mRNA和蛋白的表达[分别为(0.306±0.035)和(24.3±4.8)]则明显高于ALI模型组(q值分别为4.42和11.86,分别p<0.05,p<0.01);受体阻断后,ALIR组NF-κB mRNA表达进一步增高[(4.412±0.508) ](q=37.15,p<0.01 ) ,而采用GLY干预后, HLGR组NF-κB mRNA显著下降[(2.142±0.217) ](q=11.51,p<0.01)。(3) ALI模型组大鼠肺组织NF-κB、TNF-α、IL-10表达均有增高,GL干预后,NF-κB、TNF-α表达显著减少,而IL-10表达进一步增高;(4)ALI模型组肺组织出现充血、水肿、中性粒细胞浸润,GL干预组肺部炎症较ALI模型组减轻。结论甘草酸二铵可能通过下调NF-κB的表达,同时提高GR的表达,进而调节炎症因子TNF-α及抗炎介质IL-10的表达,从而起到减轻ALI的作用。目的观察甘草酸二铵(GL)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达的调控作用及对血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)表达的影响。方法将42只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、ALI模型组、GL干预组和地塞米松干预组。各组动物造成失血性休克,ALI模型组、GL干预组和地塞米松干预组分别给予内毒素(LPS)2mg/kg腹腔注射;LPS注射前1h,GL干预组和地塞米松干预组分别给予GL 20mg/kg或地塞米松2mg /kg腹腔注射。观察24h后各组大鼠肺组织病理,测定肺湿干比(W/D)、Pa02,并采用逆转录-PCR反应检测肺组织TGF-β1mRNA、HMGB1 mRNA的表达,ELISA法测定血清及肺泡灌洗液TNF-α、IL-10、TGF-β1浓度。结果(1) ALI模型组TNF-α为(84.52±12.78)ng/L,明显高于假手术组[(41.89±7.25)ng/L](q=17.20,p<0.01)和GL干预组[(65.13±6.64)ng/L](q=7.52,p<0.01)。ALI模型组IL-10为(53.43±6.94)ng/L,明显高于假手术组[(26.57±6.40)ng/L(]q=11.07,p<0.01),但低于GL干预组水平[(65.40±10.46)ng/L](q=5.64,p<0.05);ALI模型组TGF-β1为(366.02±18.84)ng/L ,明显高于假手术组[(150.95±14.51)ng/L](q=27.02 , p<0.01)和GL干预组[(221.28±17.91)ng/L](q=13.25,p<0.01)。(2) ALI模型组TGF-β1mRNA、HMGB1 mRNA的表达水平[分别为(1.852±0.229)和(2.622±0.387)]明显高于假手术组[分别为(0.536±0.118)和(0.332±0.013)](q值分别为10.04和17.29,均p<0.01)和GL干预组[分别为(1.207±0.251)和(1.477±0.166)](q值分别为4.28和7.85, p<0.05和p<0.01)。(3)ALI模型组肺组织出现充血、水肿、中性粒细胞浸润,GL干预组肺部炎症较ALI模型组减轻。结论甘草酸二铵可能通过抑制TGF-β1mRNA、HMGB1 mRNA及TNF-α的表达,同时增强抗炎介质IL-10的表达,从而起到减轻ALI的作用。
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