卵转铁蛋白对免疫抑制小鼠肠道免疫调节功能的影响

来源 :江西农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:xinmo2009
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卵转铁蛋白(OVT)是禽蛋蛋清中主要的蛋白质,其富含多种生物活性功能。肠道作为营养物质消化吸收的主要场所,同时作为机体外部环境与内部的环境的一道屏障,其免疫功能的平衡对机体健康至关重要。本文旨在探究OVT对环磷酰胺(CP)所致免疫抑制小鼠肠道免疫调节功能的影响,为其在营养保健食品和强化食品中的应用提供理论依据,对禽蛋的深度开发利用具有重要的学术价值和广泛的应用前景。此外,研究结果还有望揭示膳食营养成分与肠道免疫功能和微生物菌群之间的关系。将60只雌性SPF昆明小鼠适应期饲养一周后随机分成五组:Control组、模型对照组、OVT低、中、高剂量组。通过连续3天腹腔注射CP(80 mg/kg)建免疫抑制模型后,OVT低、中、高剂量组分别以2 mg/kg、20 mg/kg和200 mg/kg灌胃,Control组和CP组以等量的生理盐水灌胃,灌胃7天。试验结束后,采集小鼠的血液、脾脏、胸腺、小肠和肠道内容物。运用分子生物学技术,如流式细胞技术、ELISA、RT-PCR、Western-blot检测肠道树突状细胞的成熟、细胞因子及其基因的表达、免疫球蛋白的分泌和MAPK相关蛋白的表达。通过HE染色观察肠道组织的病理变化,利用16S rDNA高通量测序技术和PICRUSt分析肠道微生物菌群的结构变化及肠道微生物菌群功能代谢进行预测,探讨OVT对免疫抑制小鼠肠道免疫功能的调节作用,其结果如下:(1)利用CP建免疫抑制小鼠模型,探究OVT对免疫抑制小鼠机体免疫器官和体重的影响。研究发现,OVT能够减缓免疫抑制小鼠体重的下降,同时显著提高免疫抑制小鼠胸腺指数和脾脏指数(p<0.05)。结果说明OVT具备提高小鼠机体免疫调节功能的作用。(2)利用CP建免疫抑制小鼠模型,探讨OVT对免疫抑制小鼠肠道免疫调节功能的影响。研究发现OVT促进了肠道DCs的成熟,并显著提高了DCs成熟相关表型因子MHC-II、CD83的表达(p<0.01);OVT还促进细胞因子及其mRNA的表达,显著促进了免疫抑制小鼠血清中TNF-α、IL-10和IgA的分泌(p<0.05),提高了肠道组织中TNF-α、IFN-γ、IL-4和IL-10及其mRNA的表达(p<0.05);此外,OVT显著上调了肠道组织中IgA和肠道内容物中sIgA的表达(p<0.05),同时显著抑制了免疫抑制小鼠肠道组织中p38、JNK、ERK的磷酸化(p<0.01)。结果说明OVT具备提高由CP所致免疫抑制小鼠肠道免疫调节功能的能力。(3)利用CP建免疫抑制小鼠肠道损伤模型,探究OVT对肠道损伤的修复作用。通过观察肠道组织病理切片发现,OVT可以改善肠道粘膜结构,促进肠道绒毛和隐窝长度的增加,修复由CP所致肠道绒毛内部的空泡变形。结果说明OVT具备修复由CP所致免疫抑制小鼠肠道粘膜损伤的能力。(4)利用CP建免疫抑制小鼠模型,探究OVT对CP所致肠道菌群结构紊乱的调节作用。结果表明,OVT可以显著提高Alpha多样性分析指数Shannon和Simpson的表达(p<0.05),提高肠道微生物菌群的多样性;OVT显著抑制了Helicobacter和Desulfovibrio相对丰度的表达(p<0.05),促进了Lachnospiraceae-NK4A136-group相对丰度的表达水平(p<0.05)。此外,PICRUST分析发现OVT还可以显著改善由CP所致碳水化合物代谢功能的抑制(p<0.05)。综合结果表明,OVT可以改善免疫抑制小鼠肠道菌群的结构。
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