猪圆环病毒2型人工感染和重组腺病毒基因工程疫苗研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:am1047973925
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PCV2(poreine circovirus 2)主要引起断奶仔猪多系统衰弱综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS),是以发热、渐进性消瘦、呼吸困难和黄疸等征状为特征的慢性传染病。PMWS主要感染断奶仔猪和育肥猪,于1991年首先发现于加拿大西部,目前,PMWS已遍布北美、亚洲、欧洲等世界各地,成为严重危害世界养猪业的重要疫病之一。 本研究在临床征状和病理学观察的基础上用PCR方法,对2002年1月--2002年12月江苏、上海、山东、江西、安徽和浙江等省市的100家猪场146例患有断奶仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)的猪肺脏和淋巴结,进行了PCV2和PRRSV基因检测,发现24家猪场28例病料为PCV2阳性,64家猪场77例病料为PRRSV阳性,其中19家猪场21例病料同时感染了PCV2和PRRSV。从送检的病料中分离到两株PCV2,即PCV2-SH和PCV2-AH。经PCR扩增部分ORF2基因和序列分析,结果显示,两个分离株部分ORF2与国外分离毒株同源性为92%-99%,两个分离株部分ORF2基因存在一定差异。表明我国PMWS患病猪群广泛存在PCV2感染,而且大部分同时感染了PRRSV;不同地区PCV2存在一定基因差异,它们可能来源于不同国家或地区。 将24头断奶仔猪(32日龄)随机分为6组即PCV2攻毒后KLH刺激组、PCV2+PRRSV混合感染组、PCV2攻毒组、PRRSV攻毒组、钥匙孔血蓝蛋白(KLH)刺激组和对照组。每组4头,进行PCV2攻毒试验。攻毒后隔离饲养,观察临床征状并对濒死猪进行病理解剖。攻毒后不同时间采血或组织脏器,用PCR和RT-PCR检测病毒。结果为空白对照组和KLH刺激组未出现临床征状,PCV2和PRRSV攻毒组仅表现短暂的体温升高,而PCV2攻毒KLH刺激组和PCV2+PRRSV混合感染组出现明显的临床征状,其中PCV2攻毒后KLH刺激组的2头猪在攻毒后11天濒临死亡,宰杀后脏器出现明显的病理变化,各攻毒猪于攻毒后四天出现病毒血征,宰杀后肺脏、淋巴结均检测到PCV2和PRRSV。以上结果说明PCV2是引起PMWS的主要病原,KLH是PMWS的重要诱因。PCV2和PRRSV混合感染可引起PMWS。本研究成功复制了PMWS,为该病免疫预防研究奠定了重要基础。 PCV2是近年来新发现的引起仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)的必需病原,含
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