论文部分内容阅读
目的:本研究通过建立脓毒症(sepsis)大鼠急性肺损伤模型,观察肺脏病理学变化、核因子kappa B(NF-κB)的表达及血清活化蛋白C(APC)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度的变化,通过观察血必净注射液对血清APC和TNF-α及肺脏组织NF-κB表达的影响,进一步探讨脓毒症肺损伤的病理生理机制及血必净注射液的治疗作用。方法:健康成年Spragne-Dawley(SD)大鼠136只,雌雄各半,随机分为4组:空白对照组(A组)24只、假手术组(B组)24只、脓毒症组(C组)44只、血必净治疗组(D组)44只。本实验采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制作脓毒症大鼠模型。每组动物按照时间点分为6、24、48、72小时4个亚组。D组于术后0小时和每隔12小时经尾静脉注射血必净注射液8ml / kg,B组和C组于相应时间点经尾静脉注射等量生理盐水。在CLP术毕开始计时,于相应时间点将动物麻醉后,经腹主动脉采血测定血清TNF-α和APC水平,取右肺下叶行苏木素-伊红(HE)染色观察病理形态学变化,免疫组化检测NF-κB的表达。结果:1术后一般情况的观察:B组大鼠苏醒较早,剖腹未见恶臭、腹腔水肿及肠管坏死等表现。C组大鼠术后均有严重的脓毒症表现:苏醒延迟,逐渐出现精神萎靡,竖毛及呼吸困难等表现,剖腹可见恶臭味血性渗液,肠管水肿粘连,盲肠坏死变黑。D组大鼠与C组相比,临床表现明显减轻。2病理观察:A组肺组织结构完整,肺泡间隔无水肿和充血,肺泡腔无炎性细胞浸润。B组与A组无明显差异。C组可见肺泡腔充血、纤维蛋白渗出,肺泡腔内可见中性粒细胞、红细胞、淋巴细胞等大量炎性细胞浸润,血管、气管周围有不同程度的间质充血,水肿和肺大疱形成,24小时达顶峰,其后无缓解趋势。D组也出现了上述表现,但程度减轻。3 APC测定:C组于CLP 6小时后血清APC含量开始下降,与A组、B组比较差异有统计学意义(P < 0.05);随着时间延长,APC含量呈逐渐下降趋势。D组于6小时后,较C组升高,差异有统计学意义(P < 0.05);在24和48小时与C组比较差异不再有统计学意义,但依然有升高趋势。D组血清APC含量在各时间点均较A组、B组降低,差异有统计学意义(P < 0.05)。4 TNF-α测定:C组血清TNF-α浓度于CLP后6-72小时逐渐升高,与A组、B组相比,差异有统计学意义(P < 0.05)。D组血清TNF-α浓度在各时间点均显著降低,与C组相比,差异均具有统计学意义(P < 0.05)。D组各时间点血清TNF-α浓度均较A组、B组升高,差异均具有统计学意义(P < 0.05)。5肺组织NF-κB表达:A、B组偶见NF-κB阳性细胞; C组于术后6小时可以观察到NF-κB表达,48小时达高峰,并持续到72小时,C组表达量与A组、B组比较差异有统计学意义(P < 0.05)。D组表达量在相同时间点均低于C组,差异有统计学意义(P < 0.05);D组表达量在各时间点均高于A组、B组,差异有统计学意义(P < 0.05)。6大鼠死亡情况:A组与B组大鼠72小时内无死亡。C组大鼠44只中共死亡13只(病死率29.55%),D组44只中共死亡5只(病死率11.36%)。C组病死率较D组升高,二者具有统计学差异(x2 = 4.47,P < 0.05)。结论:1 CLP法能够成功复制大鼠脓毒症模型。2脓毒症大鼠血清TNF-α水平升高,APC水平降低;肺组织NF-κB表达增强。表明脓毒症时炎症反应对PC通路具有抑制作用。3血必净可以明显降低脓毒症大鼠TNF-α水平及肺组织NF-κB表达,增强APC的表达,减轻脓毒症急性肺损伤;降低脓毒症大鼠病死率。