流式细胞术检测CRLF2蛋白高表达在Ph样急性淋巴细胞白血病诊断中的作用及意义

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第一部分:流式细胞术检测CRLF2蛋白高表达对Ph样急性淋巴细胞白血病的诊断价值及意义目的探讨流式细胞术技术检测CRLF2基因表达在Ph样急性淋巴细胞白血病(Ph-like ALL)诊断中的临床应用价值及CRLF2蛋白在急性淋巴白血病患者(ALL)中的表达特点和对预后的影响。方法收集2018年1月份至2020年5月份至我院就诊的急性白血病患者的流式细胞术检测结果,其中有173例患者初诊急性白血病。根据流式细胞术检测CRLF2蛋白结果将CRLF2蛋白表达≥20%定义为高表达组,CRLF2表达<20%定义为低表达组。结合荧光原位杂交技术(FISH)、靶向二代测序突变检测、RNA测序、基因芯片综合诊断Ph-like ALL。对两组患者的临床特征和预后进行统计分析,评价流式细胞术检测CRLF2高表达诊断Ph-like ALL的特异度和敏感度,及CRLF2高表达对急性白血病患者预后的影响。结果1、173例急性白血病患者中,男有88例,女有85例。CRLF2基因高表达组有16例(9.2%),其中有5例确诊Ph-like ALL,低表达组中有157例(90.8%)患,其中4例确诊Ph-like ALL,高表达组确诊Ph-like ALL的患者更多(P=0.000)。2、CRLF2高表达组中JAK、ETV6、FLT3突变比例较高(P<0.05)3、生存分析显示,CRLF2蛋白高表达组和低表达组的中位OS时间分别为16.46和14.6个月,CRLF2高表达组中位RFS时间分别为6.42个月和10.80个月,CRLF2高表达组和低表达组2年的OS率分别为55.4%和68.3%,两组的2年的RFS分别为34.7%和64.2%率,两组的RFS差异具有统计学意义(P=0.021)。CRLF2高表达是影响RFS的独立危险因素。结论流式细胞学检测CRLF2高表达诊断Ph-like ALL的敏感度为55.56%,特异度93.29%。伴有CRLF2高表达的急性白血病预后较差。第二部分:Ph样急性淋巴细胞白血病的临床特点及预后目的探讨Ph样急性淋巴细胞白血病(Ph-like ALL)的分子生物学特点、治疗及预后。方法收集2018年1月份至2020年5月份至我院就诊所有患者的流式细胞术检测结果,有242例患者的骨髓标本中检测到CRLF2蛋白的表达,其中急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者有161例,经快速FISH诊断Ph阳性急性淋巴细胞白血病(Ph-ALL),对Ph阴性的ALL患者通过流式细胞术、多重PCR、RNA测序、基因芯片等检查筛查是否为Ph-like ALL。161例B-ALL患者根据诊断分成Ph-like ALL组、Ph-ALL组和其他B-ALL组,并对三组患者的临床特征和预后进行回顾性分析。Ph-like ALL患者予化疗联合激酶抑制剂诱导治疗,未达到CR的患者接受嵌合抗原受体T(CART)细胞治疗,在获得完全缓解(CR)后行造血干细胞移植(HSCT)。结果1、161例患者中经流式细胞术、FISH、多重PCR、RNA测序、基因测序等方式确诊的Ph-like ALL有15例,其中结合FISH和多重PCR诊断的有Ph-ALL有70例。其他B-ALL组有76例。15例Ph-like ALL患者中有6例患者复发,复发率为40%,有7例患者死亡,死亡率为46.7%。2、Ph-like ALL组患者中位总体生存(OS)时间为16.67个月(6.20~35.4个月),中位无事件生存(EFS)时间为13.30个月(1.37~34.57个月)。Ph-ALL组患者中位OS时间为18.22个月(1.40~47.53个月),中位EFS时间为13.41个月(1.40~47.53个月)其他B-ALL组患者中位OS时间为18.23个月(1.03~46.83个月),中位EFS时间为16.33个月(1.03~46.83个月)。Ph-like ALL组2年OS率和EFS率分别为55.6%、48%。Ph-ALL组2年OS率和EFS率分别为87.4%、80.2%。其他B-ALL组2年OS率和EFS率分别为91.1%、80.5%。Ph-like ALL组与Ph-ALL组的OS差异具有统计学意义(P=0.052)。Ph-like ALL 组与其他 B-ALL 组的 OS(P=0.007)和 EFS(P=0.027)差异具有统计学意义。Ph-ALL组与其他B-ALL组的EFS差异具有统计学意义(P=0.052)。初诊白细胞计数≥100×109/L(HR=2.965,95%CI 1.113-8.005,P=0.03)、确诊 Ph-like ALL(与 Ph-ALL 相比)(HR=6.298,95%CI 2.128-18.638,P=0.01)是影响B-ALL患者OS的独立危险因素。确诊Ph-like ALL(与Ph-ALL相比或与其他 B-ALL 相比)(HR=3.009,95%CI 1.067-8.490,P=0.037 或 HR=2.271,95%CI 1.051-4.960,P=0.037)是影响EFS的独立危险因素。结论Ph-like ALL患者预后较差,传统化疗联合激酶抑制剂(芦可替尼或达沙替尼)、CART等综合治疗手段使患者尽快达完全缓解,并序贯造血干细胞移植,有望改善此类患者的预后。
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