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病原微生物通过Ⅲ型分泌系统(TTSSs)将其分泌的效应因子传送到真核寄主细胞中。在固氮根瘤菌和豆科植物组成的结瘤共生体中,根瘤菌NGR234编码的Ⅲ型分泌系统负责依赖于异黄酮与NodD1蛋白的结瘤胞外蛋白(nodulation outer protein)的分泌。根瘤菌NGR234的Y41O是其中一个假定的结瘤胞外蛋白。我们利用突变掉y41O基因的衍生菌(NGRΩy41O)接种的结瘤实验和超微结构分析证明Y41O是共生体分化过程中的共生决定因子。根瘤菌NGR234的y4lO基因编码的蛋白序列与病原微生物Ⅲ型分泌系统中的效应因子(YopJ效应因子家族)具有同源性,这些效应因子已经证实了具有乙酰转移酶或蛋白酶的功能。但在大肠杆菌里表达的Y41O并不能乙酰化两个代表性的促分裂原活化蛋白激酶激酶(人类来源的MKK6和截形苜蓿来源的MtMKK1);同样,两个带组氨基标签的推导底物IPK3(肌醇-1,3,4-三磷酸5/6-激酶3)和ACTIN(豆科植物Phaseolus vulgaris来源,经酵母双杂交筛选)也不能被Y41O乙酰化。这些结果表明类YopJ蛋白功能(乙酰转移酶)的区别。本论文尝试了多种方法研究Y4IO对真核细胞的影响。y4IO基因导入烟草叶片细胞中持续表达,不能引起烟草的超敏反应;此外,我们已经构建好导入y4IO基因的T1代转基因拟南芥(Arabidopsis thaliana Col—0)和毕赤酵母(Pichia pastoris)重组菌,后续工作正在进行中。