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抗蛋白质吸附材料的研究在生物材料、医疗器械和毛细管电泳分离蛋白质等领域都具有重要的意义。为了解决蛋白质在材料表面的吸附问题,可以在材料表面涂覆具有抗蛋白质吸附性能的聚合物涂层。
研究显示,聚多巴胺(polydopamine,PDA)具有较好的黏附性能,可以牢固地吸附在多种基底表面,PDA在基底表面修饰之后将功能性聚合物进一步修饰在PDA表面,可以使功能性聚合物通过PDA更牢固地涂覆在基底表面。在此研究的基础上,通过迈克尔加成反应或席夫碱反应可以将氨基化的聚氧化乙烯单甲醚(mPEG-NH2)接枝到PDA表面,得到聚多巴胺接枝聚氧化乙烯单甲醚(PDA-g-mPEG)亲水性涂层,从而改善材料表面的性能。聚乙二醇(PEG)由于具有亲水性和电中性等性质而被广泛应用于抗蛋白质吸附材料,然而其在有氧条件下会发生自发氧化降解和链的断裂,导致其长期稳定性不好,因此在生物体内的性能很受限制。相较于PEG,聚(2-甲基-2-噁唑啉)(PMOXA)具有较好的生物相容性、亲水性和稳定性,可以应用于抗蛋白质吸附材料的制备中。利用不同的引发剂和终止剂,可以合成具有不同功能性基团的PMOXA,很容易实现PMOXA的功能化。为了将PMOXA更好地涂覆在材料表面以提高材料的抗蛋白质吸附性能,可以利用PDA作为粘结层,将PMOXA接枝到PDA表面,使材料表面形成牢固的抗蛋白质吸附涂层。本文的工作主要在以下几个方面:
1.通过氨基终止剂法合成带氨基的聚(2-甲基-2-噁唑啉)(PMOXA-NH2),并对其结构进行了表征。然后通过两步法先在pH=8.5及有氧条件下使多巴胺(dopamine,DA)在玻璃片表面进行自氧化聚合反应形成PDA涂层,然后通过PMOXA-NH2与PDA之间的迈克尔加成反应或席夫碱反应将PMOXA引入材料表面,得到聚多巴胺接枝聚(2-甲基-2-噁唑啉)(PDA-g-PMOXA)涂层。
2.采用表面等离子体共振(SPR)和石英晶体微天平(QCM-D)来研究PDA-g-PMOXA涂层的抗蛋白质吸附性能,并与PDA-g-mPEG涂层进行了比较,此外,还用CA研究了其在仿生环境中的稳定性。结果表明,经过表面改性的材料与未改性材料相比,均具有较好的抗蛋白质吸附性能,但PDA-g-PMOXA涂层的抗蛋白质吸附性能比PDA-g-mPEG涂层更好,且聚合物分子量越大,其抗蛋白质吸附性能越好。另外,基于PEG的PDA-g-mPEG涂层的稳定性受仿生环境体系的影响比基于PMOXA的PDA-g-PMOXA涂层的更大。
3.将具有抗蛋白质吸附性能的PDA-g-PMOXA涂层应用到毛细管电泳分离蛋白质中,首先研究了未涂覆毛细管,PDA涂层毛细管和PDA-g-PMOXA涂层毛细管内的EOF随缓冲体系pH值大小的变化,结果表明PDA-g-PMOXA涂层对电渗流可以起到抑制作用。然后利用PDA-g-PMOXA涂层毛细管对四种碱性蛋白质进行了分离,分别从不同缓冲溶液离子强度和不同PMOXA-NH2分子量对分离实验进行了条件优化,并在不同pH缓冲体系下进行了四种碱性蛋白质的有效分离。之后,比较了未涂覆毛细管和PDA-g-PMOXA涂层毛细管分别对六种酸碱中性混合蛋白和鸡蛋清蛋白的分离情况,结果表明,相较于未涂覆毛细管,PDA-g-PMOXA涂层由于具有阻抗蛋白质吸附的性能,故可以更有效地分离出六种酸碱中性蛋白质和鸡蛋清蛋白。