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团头鲂是我国重要的经济淡水鱼类,随着养殖规模的扩大,养殖集约化、种质资源的退化导致了团头鲂疾病的爆发,抗生素的应用也更加频繁,随着而来的残留问题受到了世界关注。本论文采用高效液相色谱法(HPLC)对团头鲂(Megalobrama amblycephala)血浆、肝脏、肾脏以及肌肉中土霉素(OTC)进行了检测。在此方法基础上研究了25℃水温下对团头鲂进行单次口灌、连续5 d口灌以及连续5 d拌饲料投喂100 mg/kg OTC,药物在健康团头鲂体内的药物动力学特征,连续5 d给团头鲂口灌后OTC的残留消除规律。1.建立了高效液相色谱(OTC)同时检测团头鲂血浆、肝脏、肾脏、肌肉中OTC的检测方法。该方法采用Agilent SB-C18(250 mm×4.6 mm i,d.,5μm)反相色谱柱,以Na2EDTA-Mc IIvaine为提取剂,乙腈-磷酸二氢钠缓冲液(20/80,V/V)为流动相,检测波长为355 nm,柱温为25℃,流速为0.5 m L/min。结果显示,在0.05–20.0μg/m L浓度范围内,标准曲线线性关系良好,OTC在血浆和各组织中的平均回收率分别为94.44%~96.07%和86.01%~91.97%。日内与日间相对标准偏差都低于10%。OTC在团头鲂血浆、肾脏、肝脏、肌肉中的检出限分别为0.015μg/m L,0.02μg/g,0.014μg/g,0.02μg/g.2.研究了在25℃水温,以100 mg/(kg·bw)的剂量给团头鲂单次口灌OTC以及连续5 d口灌OTC,药物在团头鲂体内的药物动力学和组织分布特征,以及在相同条件下将OTC拌饲料投喂,连续5 d给药100 mg/(kg·bw),药物在团头鲂体内的药物动力学和组织分布特征。从研究结果中可以看出,口灌OTC后,药物的吸收符合一级吸收一室模型;拌饲料投喂后OTC在团头鲂体内的药物动力学符合一级吸收二室模型。单次口灌后血浆、肝脏、肾脏、肌肉中OTC的吸收半衰期(t1/2(α))为5.79,9.40,6.96,和8.06 h,消除半衰期(t1/2(β))为58.63,126.43,65.10,58.85 h,达峰浓度(C max)分别为4.64μg/m L,5.05μg/g,3.38μg/g,2.86μg/g;而多次口灌给药后血浆、肝脏、肾脏、肌肉中OTC的吸收半衰期(t1/2(α))为3.62,7.33,4.59,6.02 h,消除半衰期(t1/2(β))为91.75,214.87,126.22,135.84 h,达峰浓度(C max)分别为8.60μg/m L,11.06μg/g,7.88μg/g,3.86μg/g;拌饲料投喂后,OTC在血浆,肝脏,肾脏以及肌肉中的吸收半衰期(t1/2(α))分别为0.62,42.06,11.17,8.43 h,消除半衰期(t1/2(β))分别为59.1,113.36,123.32,75.042 h。在血浆,肝脏,肾脏以及肌肉中的最高浓度分别为0.60μg/m L,1.14μg/g,0.98μg/g,0.54μg/g。研究结果表明,经过多次口灌给药后OTC在团头鲂血浆中的吸收速率比单次给药快,组织中的消除速率则比单次口灌慢,说明OTC能在团头鲂体内蓄积。连续5 d拌饲料给药后血浆以及各组织中OTC的浓度均低于连续5 d口灌团头鲂体内的药物浓度,说明拌饲料投喂会降低OTC在团头鲂体内的生物利用率。抑菌实验中OTC对嗜水气单胞菌的抑菌浓度最小为0.5μg/m L,最大为2μg/m L,均低于单次和多次口灌后OTC的血药浓度,可见在实验条件中OTC对嗜水气单胞菌有良好的抑制作用。拌饲料投喂后的血药浓度为0.60μg/m L,略高于0.5μg/m L,因此建议在生产中拌饲料投喂时可以增大剂量投喂。3.研究了25℃水温条件下以100 mg/(kg·bw)的剂量连续5 d口灌给药后,OTC在团头鲂肌肉中的消除速率。研究结果表明,在给药26 d后,OTC在团头鲂体肌肉中的药物浓度降到0.1μg/g以下,建议在该条件下的休药期为26 d。