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[目 的]通过研究原发性胆汁性胆管炎(Primary biliary cholangitis,PBC)患者肝组织中LXRs及相关因子SREBP-1、Foxp3、RORyt、IL-17、TNF-α的表达及其与肝内炎症的关系,初步探索LXRs在PBC炎症调控中的作用,并通过分析Th17、Treg细胞的特征性分子标记物RORyt和Foxp3的水平,探讨PBC患者肝组织中LXRs的表达与Th17/Treg比例失衡的相关性,为PBC早期细胞和分子事件研究及创新治疗策略的开发提供新的思路。[方 法]收集2015年10月—2019年5月期间就诊于昆明医科大学第二附属医院并经临床、血生化、自身抗体检查及肝脏穿刺病理学检查确诊为PBC的患者的肝穿刺活检标本29例(PBC组),同时收集同期住院并被确诊为慢性乙型肝炎的患者的肝穿刺活检标本15例(CHB组)和来自昆明医科大学法医学院经鉴定排除其它医疗行为和肝脏疾病的正常肝组织检材17例(NC组)。使用免疫组织化学技术检测PBC组、CHB组、NC组三组研究对象的肝组织中LXRs、SREBP-1、RORγt、Foxp3、IL-17、TNF-α、RORyt/Foxp3 的表达;根据 HE 染色结果将PBC患者按不同组织病理学表现进行分期,比较不同病理分期的PBC患者内上述因子的水平;分析PBC患者体内LXRs的表达与SREBP-1、RORyt、Foxp3、IL-17、TNF-α、RORyt/Foxp3 等因子的相关性;分析 LXRs、SREBP-1、RORyt、Foxp3、IL-17、TNF-α、RORγt/Foxp3的表达与反应肝功能水平的血清生化指标的相关性,进一步探索LXRs与PBC患者肝内炎症的关系。[结 果]1.HE染色结果根据HE染色结果对PBC组进行组织病理学分期,结果显示:PBC组Ⅰ期(胆管炎期)共7例,Ⅱ期(汇管区周围炎期)共4例,Ⅲ期(进行性纤维化期)共14例,Ⅳ期(肝硬化期)共4例。2.免疫组织化学技术检测PBC组、CHB组、NC组三组肝组织中LXRα、LXRβ、SREBP-1、RORyt、Foxp3、IL-17、TNF-α、RORyt/Foxp3 表达的结果1)LXRα和LXRβ表达情况:LXRα和LXRβ在三组研究对象的肝组织中均为阳性表达,以胞核表达为主。与NC组和CHB组比较,PBC组患者肝组织内LXRα和LXRβ的表达量均明显降低,差异具有显著性(P<0.05),CHB组与NC组之间的差异不具有显著性(P>0.05);2)SREBP-1表达情况:SERBP-1在三组研究对象的肝组织中均表达,以胞浆表达为主。PBC组、CHB组、NC组三组SREBP-1水平的差异无统计学意义(P>0.05);3)RORyt表达情况:RORyt在NC组的肝组织中呈弱阳性表达或甚至无表达,在CHB组和PBC组中表达较强,以胞核表达为主。与NC组RORyt表达量比较,PBC组和CHB组肝组织中RORyt的表达呈上升趋势,且差异具有显著性(P<0.001),CHB组与PBC组之间RORγt水平的差异不具有显著性(P>0.05);4)Foxp3表达情况:Foxp3在三组研究对象的肝组织中都表达,表达Foxp3阳性的细胞胞浆或胞核被染成棕黄色或褐色。PBC组和CHB组肝组织中Foxp3的表达量显著低于NC组(P<0.001),CHB组与PBC组之间Foxp3水平的差异不具有显著性(P>0.05);5)IL-17和TNF-α表达情况:IL-17和TNF-α在NC组的肝组织中表达较弱,在PBC组和CHB组的肝组织中表达较强,以胞浆表达为主。PBC组和CHB组肝组织中IL-17和TNF-α的表达量较NC组明显升高(P<0.001),PBC组和CHB组之间IL-17和TNF-α水平的差异不具有显著性(P>0.05);6)RORyt/Foxp3表达情况:PBC组和CHB组肝组织中RORyt/Foxp3的表达水平均明显高于NC组,差异具有显著性(P<0.001),PBC组与CHB组RORyt/Foxp3水平的差异不具有显著性(P>0.05)。3.不同病理分期的PBC患者肝组织内LXRα、LXRβ、SREBP-1、RORγt、Foxp3、IL-17、TNF-α、RORγt/Foxp3 的水平比较将29例PBC患者根据HE染色结果分为2组,早期组(Ⅰ、Ⅱ期)共计11例,晚期组(Ⅲ、Ⅳ期)共计18 例。比较LXRα、LXRβ、SREBP-1、RORγt、Foxp3、IL-17、TNF-α以及RORγt/Foxp3在PBC不同疾病分期中的表达,结果显示,与早期组相比,晚期PBC组中LXRα、LXRβ、Foxp3的表达明显降低,IL-17和RORγt/Foxp3的表达明显升高,差异具有显著性(P<0.05),其余各因子在PBC早期组和晚期组中的差异不具有显著性(P>0.05)。4.PBC 患者肝组织中 LXRs 表达与 SREBP-1、RORγt、Foxp3、IL-17、TNF-α、RORγt/Foxp3的相关性分析分析PBC患者肝组织中LXRs的表达与SREBP-1、RORγt、Foxp3、IL-17、TNF-α、RORγt/Foxp3 的相关性,结果显示 LXRα与 Foxp3、RORγt/Foxp3 具有相关性(P<0.05),其中LXRα与Foxp3呈正相关关系,相关系数1=0.460;LXRα与RORγt/Foxp3呈负相关关系,相关系数r=-0.381。LXRβ与TNF-α具有相关性,呈负相关关系,相关系数r=-0.416。5.PBC 患者肝组织内 LXRα、LXRβ、SREBP-1、RORγt、Foxp3、IL-17、TNF-α、RORγt/Foxp3的表达与肝功能水平的相关性分析为了研究 PBC 患者肝组织中 LXRα、LXRβ、SREBP-1、RORγt、Foxp3、IL-17、TNF-α、RORγt/Foxp3的表达与肝功能水平的关系,我们同时收集了 PBC组患者的 ALT、AST、ALP、GGT、TBIL、DBIL、ALB、GLB、A/G 等临床生化指标,分析其中的相关性,结果显示,仅SREBP-1与A/G具有相关性(P<0.05),呈正相关关系,相关系数r=0.380。[结 论]1.与对照组相比,PBC患者肝组织内LXRs低表达,且在早期患者中的表达明显高于晚期患者,提示LXRs可能参与PBC发生发展。2.PBC时,肝组织内Foxp3表达降低,RORγt、RORγt/Foxp3以及IL-17表达升高,Th17/Treg平衡紊乱。3.PBC患者肝组织内Foxp3表达降低,且在晚期患者中的表达显著低于早期患者,提示随着炎症活动度的加重,Treg细胞受到抑制。4.PBC 时,LXRα表达降低,RORγt/Foxp3 比例升高,且 LXRα与 RORγt/Foxp3呈负相关关系,提示LXRα或是影响PBC患者Th17/Treg平衡的重要因素,但具体机制有待进一步研究。5.与对照组相比,PBC患者肝组织内SREBP-1的表达没有明显变化。