基因检测技术的发展使精准医疗在大型医疗机构得以应用,但是民众看病难、看病贵的现实问题依然存在。如何开发基因检测的适宜技术,使分子诊断能够从三甲医院到县级医院都能方便地开展相关项目的检测,是亟待解决的问题,因此简便、快速、高效、低成本的基因检测适宜技术在分级诊疗中有着重要作用。常用的基因分型方法包括测序、限制性片段长度多态性-聚合酶链式反应、等位基因特异性聚合酶链式反应等技术,其操作步骤多、耗时长、依赖昂贵的仪器、需要专业的生物信息分析及对专业的操作操作人员,限制了这些方法在分级诊疗中的推广应用。本研究通过环介导等温扩增技术(LAMP)与金磁微粒免疫层析相结合,以MTHFR c.677 C﹥T基因分型为模型,建立“LAMP-金磁微粒层析法”基因分型技术平台。该技术经过一步快速的LAMP扩增,通过目视化判读检测线处条带的颜色,或者直接通过磁定量仪检测信号强度,从而判读待测样本的基因型。首先针对MTHFR c.677 C﹥T基因构建阳性质控体系,用于检测体系是否正常工作;其次通过对环介导等温扩增特异性引物的设计及合成,并优化扩增体系及层析系统,建立“LAMP-金磁微粒层析法”基因分型方法;以质控品对所建立方法的特异性、灵敏度、稳定性等性能开展评估;最后利用该技术平台对200例临床样本进行检测,同时以测序为对照,对方法学具有较好的临床应用性进行评估。“LAMP-金磁微粒层析法”基因分型方法,可以在20min内完成待测样本的检测,具有很好的特异性、稳定性,灵敏度可达0.5ng(基因组DNA)。本研究针对200例临床样本测定结果与金标准测序方法比对,经统计两种检测方法的一致率为100%,确定该方法具有良好的临床应用价值。基于MTHFR c.677 C﹥T建立“LAMP-金磁微粒层析法”,MTHFR c.677 C﹥T基因检测技术,为我国高发的心脑血管相关疾病,出生缺陷相关疾病叶酸剂量合理增补的基因多态性的检测,提供即时有效的个体化信息,对于指导出生缺陷防控及脑卒中一级预防具有重要应用价值。