遗传性溶血性贫血（HHA,hereditary hemolytic anemia）是一组由于编码红细胞膜蛋白、红细胞酶或血红蛋白的基因发生变异导致的遗传性疾病,以红细胞寿命缩短为特征,临床表现以溶血和溶血性贫血为主,严重程度不一。在遗传性溶血性贫血中,地中海贫血是一种较常见的血红蛋白病,葡萄糖磷酸异构酶（GPI,glucosephosphate isomerase）缺乏症是较罕见的糖酵解代谢途径中的红细胞酶缺陷。本研究分为两部分,分别对一例罕见的葡萄糖磷酸异构酶缺乏症家系和两例地中海贫血家系进行了致病基因的鉴定和遗传学研究,完善了这两种遗传性溶血性贫血的基因突变谱,为遗传性溶血性贫血的诊断提供了新的经验和思路。第一部分一例葡萄糖磷酸异构酶缺乏症家系致病基因的鉴定背景:葡萄糖磷酸异构酶（GPI）缺乏症是一种罕见的红细胞酶缺陷病,由编码葡萄糖磷酸异构酶的GPI基因突变导致,以常染色体隐性模式遗传。临床表现主要为慢性非球形溶血性贫血,少数患者伴有神经肌肉症状。本病因其罕见和症状的非典型而难以确诊。本研究纠正了一例误诊为地中海贫血的GPI缺乏症患者,并进行了进一步的基因分析和诊断。方法:采集家系成员外周血,通过血液学表型分析、地中海贫血相关突变分析、全外显子测序和致病位点筛选、Sanger测序验证等对家系进行遗传分析。随后结合突变位点生物信息预测、家系成员病史及临床表型分析和相关实验进行确诊。此外,对GPI缺乏症相关文献进行了汇总。结果:先证者携带两个未被报道过的GPI基因突变,c.1207C＞T和c.1255G＞C,分别遗传自父亲和母亲,另携带一个地中海贫血突变HBB:c.126129delCTTT,遗传自其父亲。先证者和母亲的红细胞GPI酶活性均有不同程度降低,结合临床表型和基因型等,确定先证者为GPI缺乏症。随后,通过文献查找汇总了被报道的已经过基因型验证的GPI缺乏症患者,并绘制了 GPI基因突变谱。结论:本研究描述了一名罕见的GPI缺乏症患者的临床特征和诊断过程,纠正了其“地中海贫血的误诊”。发现了两个GPI基因的新突变,丰富了 GPI基因的突变谱。在地中海流行区域发生的罕见HHA因临床表型的相似性更易被考虑为地贫而发生误诊,准确的诊断有赖于更全面的病因认知和考虑。第二部分 两个α-珠蛋白基因拷贝数变异导致地中海贫血的家系鉴定背景:地中海贫血是一种常见的遗传性血液疾病,由调节球蛋白合成的基因突变或丢失引起。遗传原因之一是α-珠蛋白基因簇的拷贝数变异（CNVs,copy-number variations）。然而,对这些CNVs的详细信息和机制还没有统一的总结和讨论。本研究在两个诊断为地中海贫血的中国家庭中发现了两个新的CNVs。方法:采集家系成员外周血,通过血液学分析、地中海贫血常规基因检测、多重连接依赖探针扩增（MLPA,multiplex ligation dependent probe amplification）、下一代测序（NGS,next-generation sequencing）等方法对这两个家系进行分析。此外,对所有已知涉及α-珠蛋白基因的CNVs进行了总结,并对这些CNVs的产生机制进行了分析和预测。结果:在2例β-地中海贫血和Hb Bart’s胎儿水肿综合征患者中分别发现了两个α-珠蛋白基因簇的新CNVs,一个重复（αααα159）和一个缺失（--259）。通过文献复习,筛选出了 42个α-珠蛋白基因的CNVs进行分析。基于突变断点区域不同的分子特征,我们认为这些CNVs的发生可能归因于几种机制。结论:本研究描述了两个涉及α-珠蛋白基因的新CNVs,为珠蛋白基因的变异谱增加了新内容。此外,对这些CNVs产生机制的探索为地中海贫血的分子病因学提供了一个机制视角。