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实验一、大鼠卵巢颗粒细胞的体外培养及鉴定目的:在前期研究的基础上,分离大鼠卵巢颗粒细胞进行原代培养,并探索其增殖高峰期,为下一步实验确定最佳检测时间点。方法:将雌性成年SD大鼠皮下注射孕马血清促性腺激素(PMSG) 40IU,48h后将大鼠以颈椎脱臼法处死,迅速剖取卵巢放入PBS液中冲洗,用空针针头刺破卵泡,释放卵泡内颗粒细胞,吹打分散后过滤,离心后弃上清液,收集细胞,细胞培养瓶中加入DMEM/F12/青链霉素/胎牛血清培养液,于37℃、5%CO2培养箱中培养,24h后换液,将培养24h贴壁的大鼠卵