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目的:采用改良的Feeney’s自由落体损伤装置建立重型颅脑损伤动物模型,运用此模型进行实验研究:1.亚低温对重型颅脑损伤后大鼠TRPM2、caspase-9表达的影响;2.去骨瓣减压术对重型颅脑损伤后大鼠TRPM2、caspase-9表达的影响;3.亚低温治疗联合去骨瓣减压术对重型颅脑损伤后大鼠TRPM2、caspase-9表达的影响;4.通过TRPM2、caspase-9的表达比较单纯两种治疗及联合治疗方式对重型颅脑损伤疗效的影响;5.为TRPM2通道靶点在STBI治疗上的深入研究提供依据。方法:选取SPF(specific pathogen free)(清洁)级成年SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠192只,体重280g~340g。随机分为4组,颅脑损伤组(STBI组即仅钻孔打击)48只,颅脑损伤后亚低温治疗组(STBI+MHT组)48只,颅脑损伤后去骨瓣减压治疗组(STBI+DC组)48只,颅脑损伤后亚低温联合去骨瓣减压组(STBI+MHT+DC组)48只,各组又根据打击后不同时间点分为6个亚组,分别为打击后6h、12h、24h、48h、72h和168h,每个时间点8只大鼠。损伤后不同时间点进行断头,取脑损伤处脑组织来测定脑组织含水量(干湿称重法)、检测TRPM2、casepase-9的表达(免疫组化法)。结果:1.干湿称重法结果:STBI组脑组织含水量:伤后6h开始增加,12h进一步增加,24h达高峰,48h开始降低,72h明显降低,168h降低更明显。STBI+MHT组伤后6h、12 h递增,24h达到高峰,48h、72h递减,168h仍有水肿,与STBI组比较,各时间点脑组织含水量有显著差异(p<0.05);STBI+DC组伤后6h、12h递增,24h达到高峰,48h、72h递减,168h仍有水肿,与TBI组比较,各时间点脑组织含水量有显著差异(p<0.05);与STBI+MHT组比较,各时间点脑组织含水量有显著差异(p<0.05);STBI+MHT+DC组伤后6h、12h递增,24h达到高峰,48h、72h递减,168h趋于正常,与STBI组比较各时间点脑组织含水量有显著差异(p<0.05);与STBI+MHT组及TBI+DC组比较,伤后各时间点脑组织含水量有显著差异(p<0.05)。2.免疫组化法结果:TRPM2的阳性细胞表达随时间的变化而变化,在伤后6h、12h、24h、48h、72h、168h的各时间点,TRPM2的表达呈现出先升高后降低的趋势,伤后6h即有升高,24h达到高峰,伤后168h降至最低。STBI+MHT组与STBI组比较各时间点TRPM2表达有显著差异(p<0.05);STBI+DC组与STBI组比较各时间点TRPM2表达有显著差异(p<0.05);STBI+DC组与STBI+MHT组比较各时间点TRPM2表达有显著差异(p<0.05);STBI+MHT+DC组与STBI组比较各时间点TRPM2表达有显著差异(p<0.05);STBI+MHT+DC组与STBI+DC组各时间点TRPM2表达有显著差异(p<0.05);STBI+MHT+DC组与STBI+MHT组各时间点TRPM2表达有显著差异(p<0.05)。Casepase-9的阳性细胞表达随时间的变化而变化,在伤后6h、12 h、24h、48h、72h、168h的各时间点,casepase-9的表达呈现出先升高后降低的趋势,伤后6h即有升高,24h达到高峰,伤后168h降至最低。STBI+MHT组与STBI组比较各时间点casepase-9表达有显著差异(p<0.05);STBI+DC组与STBI组比较各时间点casepase-9表达有显著差异(p<0.05);STBI+DC组与STBI+MHT组比较各时间点有显著差异(p<0.05);STBI+MHT+DC组与STBI组比较各时间点casepase-9表达有显著差异(p<0.05);STBI+MHT+DC组与STBI+DC组各时间点casepase-9表达有显著差异(p<0.05);STBI+MHT+DC组与STBI+MHT组各时间点casepase-9表达有显著差异(p<0.05)。结论:1.本实验方法采用改良Feeney’s法自由落体制作颅脑损伤模型,成功建立大鼠重型颅脑损伤模型,其制作方法具有简单、可控性好、可重复性好的特点;2.颅脑损伤后氧化应激可使过度的TRPM2表达,Caspase-9表达水平相应增加,促使细胞凋亡,加重继发性脑损伤;3.去大骨瓣减压、亚低温治疗均对重型颅脑损伤具有治疗作用,且两种治疗方法具有协同作用,联合治疗优于单一治疗。