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背景:儿童多发性抽动症(Tourette综合征,Tourette Syndrome,TS)与神经递质失衡和氧化应激反应损伤密切相关,针刺疗法是本病重要的有效疗法之一,本研究在理论研究基础上,通过观察熄风止痉法治疗模型大鼠的疗效,及对神经递质、氧化应激指标的影响,探讨针刺疗法的作用机制。目的:在理论研究基础上,观察模型大鼠行为学改变以及血清中神经递质、氧化物、抗氧化物含量的表达、脑组织中受体信号蛋白的表达,探讨熄风止痉针刺法治疗多发性抽动症的作用机制,为临床推广应用针刺法治疗本病提供实验室依据。方法:将50只SD大鼠分笼、适应性喂养,给予5天常规饮食。随机分为5组,即空白组、模型组、硫必利组、针刺1、2组,各10只。除空白组外,其余4组大鼠于腹腔注射选择性5-HT(2A/2C)受体激动剂 1-(2,5-dimethoxy-4-iodopheny 1)-2-aminopropane(DOI)1mg/kg,制备多发性抽动症大鼠模型,共造模3周。当大鼠不自主的出现头、肩的抽搐、晃动等持续刻板动作后,显示造模成功。给药时硫必利组给予15 mg·kg-1灌胃,空白组、模型组予同体积生理盐水灌胃,针刺1组针刺脾俞、肾俞穴,针刺2组针刺大椎、身柱穴。操作方法:固定大鼠,所刺穴位局部剃毛后,采用25mm×25mm华佗牌针灸针,直刺4-5mm。留针10min,每3min行针一次,每周针刺5天,每天1次,共21天。对大鼠进行行为学观察;酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测血清中神经递质含量;硫代巴比妥酸(TBA法)、超氧化物歧化酶WST-1法、微量酶标法检测氧化物(MDA)、抗氧化物(SOD、GSH)含量变化;蛋白免疫印迹法(Western Blot技术)检测多发性抽动症大鼠脑组织中D1、D2、NMDA受体的表达。结果:1.熄风止痉针刺法对多发性抽动症大鼠行为学的影响模型组与空白组相较,运动评分显著增高(分别为24.66±4.14分;0±0分),具有统计学意义(P<0.01);针刺1组、针刺2组与模型组相较,运动评分明显降低(分别为18.66±5.09分;13.17±4.51分),说明针刺治疗有效,其中针刺2组效果更明显,具有统计学意义(P<0.01)。结果:针刺大椎、身柱穴较脾俞、肾俞穴更能达到治疗效果。模型组与空白组相较,刻板评分显著增高(分别为63.77±5.67分;0±0分),具有统计学意义(P<0.01);针刺1组、针刺2组与模型组相较,刻板评分明显降低(分别为33.32±5.17分;14.31±3.22分),说明针刺治疗有效,其中针刺2组效果更明显,具有统计学意义(P<0.01)。结果:从改善行为学效果评估,针刺大椎、身柱穴较脾俞、肾俞穴疗效更好。2.血清中单胺类类神经递质及脑组织纹状体中相关受体检测结果模型组大鼠血清中多巴胺(DA)含量较空白组明显升高(分别为821.63±86.10ng/ml;416±91.21 ng/ml),具有统计学意义(P<0.05);硫必利组(594.13±11.97 ng/ml)、针刺 1组(656.63±38.96 ng/ml)、针刺2组(510.38±43.37 ng/ml)较模型组明显减低,具有统计学意义(P<0.05);针刺2组较硫必利组降低更明显。与空白组相比,模型组大鼠脑组织纹状体中D1R、D2R表达增强(分别为1.39±0.00 μg/g;3.22±0.00μg/g),具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,针刺2组D1R、D2R表达减弱(分别为0.93 ±0.00μg/g;0.92±0.01 μg/g)。结果:针刺2组在调节单胺类递质水平及受体表达方面效果更明显。3.血清中氨基酸类神经递质及脑组织纹状体中相关受体检测结果大鼠血清中谷氨酸(Glu)含量未检出;模型组大鼠血清中γ-氨基丁酸(GABA)含量较空白组明显降低(分别为156.00± 1.64 ng/ml;172.18±1.58 ng/ml),具有统计学意义(P<0.05);针刺1组、针刺2组较模型组升高(分别为159.92±1.21 ng/ml;166.15±1.92 ng/ml),其中针刺2组血清中GABA含量升高更明显,具有统计学意义(P<0.05);针刺2组较硫必利组(161.80±0.39 ng/ml)升高,具有统计学意义(P<0.05)。与空白组相比,模型组大鼠脑组织纹状体中NMDAR蛋白表达增强(分别为3.06±0.02 ug/g;1.00±0.00 ug/g),具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,针刺2组NMDAR蛋白表达减弱(1.67± 0.03 ug/g),具有统计学意义(P<0.05)。结果:针刺2组在升高GABA含量、降低NMDAR蛋白表达方面效果更显著。4.血清内氧化物、抗氧化物含量检测结果本实验采用谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒进行相应指标检测,结果示含量为负值,无法进行统计学分析。结论:熄风止痉针刺法(即针刺大椎、身柱穴)具有改善模型大鼠抽动行为的良好效果,其作用机制与调节神经递质失衡及受体表达有关。