随着畜牧业的集约化和规模化发展,腹泻作为多种疾病的伴随症状,越来越多发,通常会阻碍畜禽生长发育,甚至引起死亡,因此,腹泻的防治已成为畜牧养殖业亟需解决的难题。日前治疗腹泻主要借助于抗菌药物,但使用这类药物有很多隐患,因此从更健康的天然中药中寻找抗腹泻药为重中之重。飞扬草为大戟科大戟属植物飞扬草（Euphorbia hirta L.）的干燥全草,在民间医药中被广泛用于抗菌、抗癌、抗炎和抗腹泻等。此前有研究发现槲皮苷是飞扬草抗腹泻的有效成分之一,但未通过生物活性导向分离出其它有效成分。因此,本实验在对飞扬草中总黄酮的提取工艺优化的基础上,利用生物活性导向追踪抗腹泻作用的主要活性成分,并对其抗腹泻活性与离子通道的关系进行了初步探究,为飞扬草在抗腹泻方面的临床应用奠定了理论基础。具体研究内容如下:（1）飞扬草总黄酮提取工艺的优化。以总黄酮提取率为考察指标,在单因素实验基础上,采用三水平四变量的Box-Benken设计的响应面法对飞扬草的总黄酮提取工艺进行了优化。优化得到最佳提取工艺条件为提取温度91℃、乙醇浓度55%、料液比1:30、提取时间184min,提取2次。在此条件下,总黄酮测定含量为6.32±0.47%,与预测值6.26%接近。（2）飞扬草抗腹泻药效物质基础的研究。建立蓖麻油腹泻模型,以腹泻抑制率为考察指标,对飞扬草总黄酮进行活性成分追踪。先依次用乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,腹泻抑制率表明乙酸乙酯部位活性最强（腹泻抑制率44.9%）。再用D101大孔吸附树脂进一步富集有效部位,发现30%乙醇洗脱部位的抗腹泻效果最显著（P＜0.05）,再用硅胶柱色谱、制备液相色谱进一步分离纯化,得到两个纯化合物,经鉴定为槲皮苷和异槲皮苷。（3）槲皮苷和异槲皮苷抗腹泻活性及机制的初步研究。采用三个不同剂量的槲皮苷和异槲皮苷对其抗腹泻活性、炎性活性和对离子通道的作用进行了评价,结果显示,与腹泻模型组相比,槲皮苷和异槲皮苷各剂量组都可以减少稀便数、抑制炭粉的推进距离、减少小肠积液量,并且异槲皮苷的抗腹泻作用优于槲皮苷。通过q RT-PCR检测发现,相比腹泻模型组,槲皮苷和异槲皮苷组的抗炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6 m RNA水平都降低,而离子通道中NHE1、NHE2、NHE3、AQP4、SGLT1的表达都上调,而CFTR的表达下调且程度最大。因此,用Autodock 4.2软件进一步对槲皮苷和异槲皮苷与CFTR结合能力进行预测,结果显示槲皮苷和异槲皮苷都与NBD1和NBD2位点有一定的结合力,但异槲皮苷与NBD2的结合力更强,从而初步推断槲皮苷和异槲皮苷主要通过结合到CFTR上的NBD1和NBD2来发挥抗腹泻作用。本研究不仅确定了飞扬草抗腹泻的主要有效成分,还对其抗腹泻机制进行了探讨,为飞扬草有效成分体内药动学、药代学研究提供了前提,也为飞扬草质量控制方法的建立奠定了基础,为中药现代化做了有意义的探索。