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目的:本课题拟以蒙药苏格木勒-3水提物为研究对象,在研究其体内外化学成分及含量测定的基础上结合治疗失眠的药效学筛选研究,旨在揭示蒙药苏格木勒-3水提物有效物质基础并对其进行质量控制研究,以期为本方继续深入开发研究提供科学依据。方法:1)制备蒙药苏格木勒-3水提物,并制备样品及对照品溶液。液相条件:ACQUITY UPLC HSS T3 C18（2.1 mm×100 mm,1.8μm）色谱柱;流动相甲醇（A）-0.1%甲酸水（B）,梯度洗脱:0～2 min,100%A;2～9 min,100%～90%A;9～14 min,90%～72%A;14～16 min,72%～38%A;16～20 min,38%～32%A;20～40 min,32%～12%A;40～42 min,12%～0%A;42～45 min,0%A;45～50 min,100%A,流速:0.2 ml/min,柱温30℃,进样量:5μl。质谱条件:电喷雾电离离子源（ESI）,扫描范围m/z为100～1500,正离子模式检测,毛细管电压为3.5 k V,分辨率为70000,高能量扫描时trap CE电压为20～60 e V,毛细管温度为320℃,辅助气体流速10 Arb。分析蒙药苏格木勒-3水提物化学成分。2)液相条件:色谱柱:Agilent Eciipse XDB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,柱温:30℃,检测波长:225 nm和342 nm,流动相:甲醇-0.1%磷酸水（40∶60）,流速:1.0 ml/min。在此条件下,对蒙药苏格木勒-3水提物中芹菜素与胡椒碱进行含量测定。3)将大鼠分为空白、苏格木勒-3、白豆蔻、香旱芹、荜茇水提物组,按临床剂量40倍给药,给药后30min、60 min、90 min后分别取空白血清及含药血清以及脑组织。另取血清140μl,加入560μl乙腈,涡旋3 min,4℃,13000 r/min离心10 min,取上清液,蒸干,再加100μl水复溶,进样。另取1 g脑组织匀浆,加入10 ml乙腈,涡旋3min,4℃下13000 r/min离心10 min,取上清液,蒸干,再加200μl水复溶,进样。按照蒙药苏格木勒-3水提物体外化学成分研究相同分析条件进行蒙药苏格木勒-3水提物入血与入脑成分分析。4)将小鼠随机分为空白组,苏格木勒-3高、低剂量组,阳性对照组（阿普唑仑）,苏格木勒-3各单味药水提物高、低组,苏格木勒-3各药对水提物高、低组,灌胃给药1次/日,连续5天,空白组按0.2 ml/10 g剂量灌生理盐水。给药前把小鼠投入自主活动测试仪中适应2min,给药后60 min,记录5 min的动物活动次数和站立次数。末次给药1 h后,每鼠腹腔注射戊巴比妥钠50 mg/kg,观察记录入睡潜伏期（翻正反射消失时间）和睡眠持续时间（翻正反射消失至恢复的时间）。将大鼠随机分为空白组、模型组、苏格木勒-3汤水提物高及低剂量组、阳性组、苏格木勒-3各单味药水提物高、低组,苏格木勒-3各药对水提物高、低组,灌胃给药1次/日,连续灌胃7天。制作PCPA失眠模型,采用ELISA法检测各组大鼠脑内5-HT与GABA的含量,并测定脑组织细胞因子IL-1β及SOD、MDA的含量。实验数据应用SPSS.22.0统计学软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差表示,多组间差异采用单因素方差分析（ANOVA）,组间采用t检验。结果:1)从苏格木勒-3水提物中最终鉴定出42个化学成分峰,其中主要包括氨基酸类、酚酸类、黄酮类、内酯类、生物碱类等,并与各单味药图谱比对,进行了归属。2)芹菜素Y=673.24X+1.2121,r=0.9996、胡椒碱Y=1145.2X+9.3705,r=0.9999。芹菜素在0.125～2μg范围内,胡椒碱在0.873～13.97μg范围内峰面积值与进样量呈良好的线性关系,芹菜素与胡椒碱平均回收率分别为93.53%、98.13%,精密度RSD分别为芹菜素1.02%、胡椒碱1.60%。所建立的含测方法简单、精确、可行。3)蒙药苏格木勒-3复方及各单味药水提物血清中最终确定8个化学成分峰。其中主要包括L-脯氨酸、L-酪氨酸、对羟基安息香醛、木犀草素-7-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、Piperlonguminine、胡椒碱、香紫苏内酯等,并比对各单味药含药血清图谱,对来源进行了归属,从蒙药苏格木勒-3水提物的脑组织特征图谱中确定了9个化学成分峰。其中主要包括L-脯氨酸、L-亮氨酸、L-酪氨酸、鸟苷、白术内酯Ⅱ、异土木香内酯、Piperlonguminine、胡椒碱、莪术烯醇等,并比对各单味药含药血清图谱,对来源进行了归属。4)在对小鼠自主活动影响方面:苏格木勒-3各单味药及药对水提物均可显著降低小鼠活动时间与站立次数;在对催眠剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠时间的影响方面:苏格木勒-3各单味药及药对水提物中,苏格木勒-3水提物、白豆蔻水提物、香旱芹水提物及各药对组可缩短入睡潜伏时间,荜茇组不明显;苏格木勒-3水提物具有显著的延长睡眠时间,其余单药及药对组在延长睡眠时间方面作用不明显;在对PCPA失眠大鼠脑组织相关神经递质影响方面:苏格木勒-3水提物、单药及药对组可提高PCPA失眠模型大鼠GABA与5-HT的含量;在对PCPA失眠大鼠脑组织相关细胞因子影响方面:苏格木勒-3水提物复方、单药及药对组在IL-1β等细胞因子方面效果不是很明显,苏格木勒-3水提物单药及药对组可提高SOD含量,降低MDA含量,但是差异较不明显。结论:1)苏格木勒-3水提物均有镇静催眠作用,其机制是通过调节神经递质,而对细胞因子作用不明显,其中以L-脯氨酸、胡椒碱与芹菜素为代表的氨基酸、生物碱及黄酮类成分及代谢的内酯可能为苏格木勒-3水提物潜在的有效物质基础。2)本文通过在研究苏格木勒-3水提物体内外化学成分及含量测定的基础上结合治疗失眠的药效学筛选研究,对其进行了全面的质量控制研究。