论文部分内容阅读
以小球藻NC64A株系为寄主，从14个省市采集的数百个水样中普遍得到了病毒分离物，初步表明小球藻病毒在我国的分布是十分广泛的。其中富营养化的水体中小球藻病毒滴度普遍较高，而在山泉等含有机质较少的水体中病毒滴度较低。病毒在水体中的含量随季节的变化而变化，夏季较高，冬季较低。研究还表明小球藻病毒对宿主有很强的专一性。对病毒分离物中的11株病毒进行了较为详细的研究，发现这些病毒具有许多相同的性质，如均为球形多角体，基因组为300kbp左右的dsDNA。由于小球藻病毒与害主的关系具有严格的专一性，所以这11个病毒分离物均属于NC64A小球藻病毒。但对病毒生物学性质的研究表明，这些病毒间存在着差异：如11个病毒分离物的大小不同；基因组DNA限制性酶切图谱（除BJ-1B和BJ-2C相同外）不同等。所以，它们应属于同一类病毒的不同的病毒株系。 用3％～10％的PEG8000加3％～7％的NaCl沉淀小球藻病毒FJ-1。其中以7％的PEG和4％的NaCl沉淀效果最好，而且不影响FJ-1侵染活力及其形态特征。但PEG的沉淀效率要低于超速离心的效率，前者病毒的收率为21％，后者病毒的收率为36％。 本文还根据文献报道设计特异性的寡核苷酸引物，以PBCV-1基因组DNA为模板，PCR扩增小球藻病毒几丁质酶基因A181并将A181 DNA克隆到pUC19的EcoRI、SalI位点中，得到克隆载体pUC181，通过其四个亚克隆的构建完成了该基因的全序列测定。