Yippee转基因果蝇品系的建立及基因功能的初步研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cxx163252
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心脏发育是一个错综复杂的过程,在分子机理上被一套进化上保守的转录因子(NK2、MEF2、GATA、Tbx和Hand等)控制,它们决定心脏细胞的发育方向,决定了编码收缩蛋白基因的表达和心脏结构形态的建成。同时,它们在神经发生、心肌细胞发生、血细胞发生和癌细胞发生过程中也发挥着重要的调节作用。本文研究的Yippee基因编码一个高度保守序列的锌指结合蛋白,从真菌到人类的68种真核生物中都发现了它的同源蛋白。Yippee在果蝇发育的不同阶段以及在人类胎儿的不同组织中广泛表达,提示Yippee可能具有重要的生物学功能。2003年,通过酵母双杂交作用绘制的果蝇蛋白相互作用图谱显示,Yippee基因通过CG15676基因与心脏发育相关基因Wg、Mef2等有联系,即Yippee基因可能影响心脏发育调控基因的信号途径,故推测Yippee可能与心脏发育相关。我们采用RT-PCR的方法扩增果蝇Yippee基因cDNA,构建pUAS-Yippee-IRES-GFP绿色荧光过表达质粒,再通过果蝇胚胎显微注射和mini-white标记基因筛选建立了转基因果蝇品系。将该转基因品系与Hand-GAL4杂交、RNA干扰品系分别与Hand-GFP品系杂交,在荧光显微镜下观察杂交后代的心管和淋巴腺的表型改变,以期来确定Yippee基因在心脏发育调控中的可能作用
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