论文部分内容阅读
植物在长期进化中演变出许多策略来应对磷胁迫,如:根形态的改变、磷吸收活性的增加、有机酸的分泌、磷脂酶的分泌等等。虽然很多参与低磷调控网络的因子已经被鉴定出来,但植物是如何感知低磷信号并作出相应反应,其分子机制仍不是十分清楚。MicroRNA(miRNAs)是一种内源性的非编码小 RNA,近年来在植物逆境胁迫中的功能逐渐受到人们的关注。Chiou等发现,miR399和它的靶基因PHO2在调控磷平衡过程中扮演重要的角色,而本实验室的前期工作发现miR156在低磷条件下也受诱导并参与磷平衡过程。那么,miR156与miR399在低磷调控中是否存在一定的关系,目前仍不清楚。 本研究对WT、35S:MIM156、35S:rSPL9突变体一系列低磷胁迫表型进行比较,发现与野生型相比35S:MIM156及35S:rSPL9表现为:叶片磷含量升高、根际酸化缺失、花青素含量以及侧根数目和长度都明显减少,说明miR156-SPL9参与低磷调控过程。通过检测响应低磷的磷饥饿诱导基因以及磷转运蛋白PHT1家族的表达量变化情况,发现PLDZ2、PHO2在突变体中的表达明显受到抑制,而其他低磷响应基因表达量上调。另外,在低磷条件下,35S:MIM156及35S:rSPL9中miR399前体基因表达量明显升高;通过观察miR399的前体基因miR399f、miR156的前体基因miR156a以及SPL9的组织染色情况,发现miR399、miR156以及SPL9表现出部分相似的表达模式;酵母单杂交和瞬时表达分析实验结果显示:SPL9能够与miR399f启动子中GTAC motif结合。由上述结果表明,miR156及其靶基因SPL9通过调控miR399的表达参与低磷调控过程。综上所述,我们认为miR156及SPL9参与了植物一系列的低磷响应过程,并通过调控下游基因miR399f形成拟南芥中响应低磷的信号通路,加深我们对低磷条件下高等植物转录调控的理解。揭示了miR156-SPL9组件可能在植物的发育和胁迫响应方面起到了广泛而重要的作用。