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人类基因组测序工作的完成,使得对基因功能及组成形式的鉴定成为可能。在早期的研究中,存在一种普遍的共识,即人类基因的的存在形式相对于低等生物如细菌等是非常松散的。但是在近些年的研究中,越来越多的针对单个基因的研究,及生物信息学的整体研究都证实,在人类基因组中存在以双向启动子形式紧密相连的基因对,而且数量的丰富度非常惊人。本文论述了这种双向启动子形式的数量,功能,序列特征,表达模式等在科学应用中,组织特异性的启动子被广泛应用,这种启动子相对于持家基因的启动子有着更清楚的机理。现在的实验已经能够应用基因融合技术创造出各种同源,异源,组成型,特异性表达的双向启动子。
本实验室在以前实验的基础上,改造了一个CAMV35S双向启动子为具有GFP及dsRED双可视报告基因的通用型双向启动子。这个改造的双向启动子在本文中进行了进一步的探讨。通过基因转染技术,在宿主烟草植株中,对此双向启动子的各种荧光表现,通过荧光显微镜及荧光风光光度计的方法进行了深入检测。在放大倍数为20倍时,当最小曝光时间为10毫秒时,在转基因植物中绿色荧光蛋白可见清晰图象.当最小曝光时间为40毫秒时,在转基因植物中,红色荧光蛋白可见清晰图象。通过荧光分光光度计法分析,得到在转基因植株中,GFP的相对荧光强度为0.76AU,但DsRed没有明显信号。
除去应用领域,在植物中尚无对天然存在的双向启动子的探讨。因为在人类及其他有脊椎动物的DNA修复基因家族中,存在大量持家基因的双向启动子报道。所以以此为切入点,根据过往数据,本文总结了所有拟南芥植物基因组中各种DNA修复基因。希望对以后在植物中天然双向启动子研究的进一步检测有所帮助。