论文部分内容阅读
经皮腔内血管成形术是血管疾病治疗领域的革命性变革。1986年Sigwart等首次将血管内金属支架用于冠状动脉,从而揭开了血管狭窄性疾病治疗的新纪元。然而通过临床观察,发现接受金属裸支架植入的患者,出现了动脉支架内再狭窄的情况,其发生率高达20%~30%,其中术后3~6个月为高峰期,6个月后明显降低。药物涂层支架通过金属支架表面的聚合物携带药物,植入病变部位后,药物自聚合物中缓慢释放进而在病变局部发挥持续高效的生物学效应,使再狭窄率降至10%以下。但是药物涂层支架出现的内皮化延迟并导致支架内晚期、极晚期血栓形成等新的问题,因此,通过新型药物涂层的设计,达到内皮快速修复、防止再狭窄和晚期血栓形成的支架成为该领域中的研究热点。药物涂层支架优化主要集中在药物、载体、制备技术三大方面。本文选用抗血小板膜糖蛋白Ⅲa单克隆抗体(SZ-21)和多西他赛(DTX)为药物,分别选择壳聚糖(CS)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为药物载体,利用超声雾化喷涂技术,制备不对称双面药物涂层支架,管腔层为SZ-21和CS,外壁层为SZ-21、CS、DTX和PLGA。经体外检测和表征后,将制备的双面药物涂层支架植入到新西兰大白兔的颈动脉检测支架植入部位双面药物涂层支架内膜增生和血栓形成的情况。论文的主要内容和结果如下:1)超声雾化装置的优化和双面药物涂层支架的制备。对本实验室自主研发的超声雾化装置进行改进、优化。优化的涂层参数为:CS和SZ-21的涂层加工工程数为15,支架的旋转速度为2 r/s,支架前进速度为1 r/s;PLGA和DTX涂层的加工工程数为8,支架的旋转速度为3 r/s,支架前进速度为2 r/s。采用此参数制备双面药物涂层支架,用于后续试验。2)双面药物涂层支架的表征。制备的双面药物涂层支架经扫描电镜观察,药物涂层均匀分布,无聚集现象;涂层的表面元素分析证明了涂层的完整覆盖;球囊扩张实验说明支架扩张前后涂层无脱落现象;经荧光标记试验证明,支架上的药物呈现双面不对称分布,涂层药物释放实验结果显示,前24 h之内,以SZ-21释放为主,SZ-21的累积释放率为40.11%,而DTX的累计释放率为27.22%;第7d,以DTX释放为主,SZ-21的累计释放率为48.88%,而DTX已达到42.22%;到28 d,SZ-21累计释放率达到64.27%,DTX的累计释放率为53.23%,28 d后,SZ-21和DTX分别剩下35.73%和46.77%。3)双面药物涂层支架血液相容性检测和抑制VSMCs增殖的作用。经检测,双面药物涂层支架溶血率低于低于5%,符合国家标准,含有SZ-21的涂层支架能够延长正常血浆的APTT、PT、TT时间,减少纤维蛋白原在支架表面的吸附量和血小板的粘附;双面药物涂层支架与血管平滑肌细胞共培养1、3、5d后,经过MTS增殖实验以及免疫荧光染色证明,含有DTX的涂层支架能够显著抑制血管平滑肌细胞在支架表面的增殖。4)双面药物涂层支架的兔颈动脉植入实验研究。将双面药物涂层支架、316L不锈钢裸支架植入兔的颈总动脉,4周和12周后,对植入支架段血管、主要脏器组织进行扫描电镜和组织切片染色观察,并对颈静脉血进行血液生化指标检测,结果表明双面药物涂层支架支架在3个月内安全、可靠,同时能有效防止血栓形成和支架内再狭窄。