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目的：构建LRP16基因真核表达质粒EX-Y2069-M29,为将其转染人子宫内膜癌HEC-1-B细胞,建立稳定表达L HEC-1-B RP16蛋白的细胞株,并检测LRP16蛋白在人子宫内膜癌HEC-1-B细胞中的表达。方法：采用PCR逆转录cDNA扩增LRP16基因全长,亚克隆到真核表达载体pReceiver-M29内,构建出重组真核表达质粒EX-Y2069-M29,酶切及DNA测序证实重组质粒EX-Y2069-M29正确插入LRP16的核苷酸序列。脂质体法将EX-Y2069-M29转染HEC-1-B细胞,并用Western blot免疫印迹法检测在人子宫内膜癌HEC-1-B细胞中LRP16蛋白表达。结果：1、LRP16基因总RNA在提取进程中没有发生明显的降解,说明总获得的RNA和mRNA完整。PCR扩增后的产物在约980bp处出现明显的特异性条带,与理论预计的cDNA片段长度一致。2、LRP16基因真核表达质粒EX-Y2069-M29成功构建,重组质粒EX-Y2069-M29经酶切和测序鉴定,表明均含有大小正确的LRP16基因片段。3、Western blot免疫印迹法检测在人子宫内膜癌HEC-1-B细胞中LRP16蛋白表达。空白对照组和EX-NEG-M29组LRP16蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)；EX-Y2069-M29组与空白对照组LRP16蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05)；EX-Y2069-M29组与EX-NEG-M29组LRP16蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：1.LRP16基因片段被成功插入真核表达载体EX-Y2069-M29质粒的多克隆位点,成功构建了LRP16基因的重组真核表达质粒EX-Y2069-M29。2.构建的LRP16基因重组真核表达质粒EX-Y2069-M29转染HEC-1-B细胞后,可在HEC-1-B细胞中稳定表达,为进一步研究LRP16基因奠定了基础。