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目的:本研究通过建立肝纤维化大鼠模型,动态观察模型大鼠肝脏组织内TGF-β1、b FGF和α-SMA的表达,探讨TGF-β1、b FGF在肝纤维化进程中的作用与机制;通过对肝纤维化早、中、晚期大鼠行脾切除术,观察肝脏中TGF-β1、b FGF和α-SMA表达的变化,探讨脾脏与肝纤维化发展机制的关系。方法:实验一:按照随机原则,将50只雄性SD大鼠分为正常组、建模2周组、建模4周组、建模6周组和建模8周组,对模型组大鼠腹腔注射40%四氯化碳溶液,剂量为2ml/kg,每周2次,共计8周,建立肝纤维化模型;正常组于建模前处死,其余分别于建模第2、4、6和8周处死。实验二:按照随机原则,将48只雄性SD大鼠分为A、B、C三大组,对模型组大鼠腹腔注射40%四氯化碳溶液,剂量为2ml/kg,每周2次,共计8周,建立肝纤维化模型;每一大组设立实验组和对照组,建模第2周、4周、6周分别对A、B、C三组实验组大鼠行脾切除术,各对照组同期行假手术;建模至第8周处死所有大鼠。留取肝脏标本,HE染色观察肝脏组织的病理变化,免疫组化检测各组大鼠肝脏组织内TGF-β1、b FGF和α-SMA的表达;应用实时荧光定量PCR(q PCR)检测各组大鼠肝脏组织内TGF-β1m RNA、b FGFm RNA和α-SMAm RNA的水平。结果:实验一:(1)免疫组化染色结果显示:随着造模时间的延长,各模型组肝脏组织中TGF-β1、b FGF和α-SMA的表达逐渐增加。模型组肝脏组织中TGF-β1、b FGF和α-SMA的表达均较正常组表达高(P<0.05)。TGF-β1、b FGF与α-SMA的表达呈正相关。(2)实时荧光定量PCR检测结果显示:随着造模时间的延长,TGF-β1m RNA、b FGFm RNA和α-SMAm RNA水平逐渐升高。模型组肝脏内TGF-β1m RNA、b FGFm RNA和α-SMAm RNA水平均较正常对照组升高(P<0.05)。实验二:(1)免疫组化染色显示各实验组肝脏组织内TGF-β1、b FGF和α-SMA的表达均较同期对照组低(P<0.05)。A、B、C三大组实验组作单因素方差分析SNK检验进行均数的两两比较,结果显示肝纤维化早期实施脾切除术,肝脏组织内TGF-β1、b FGF和α-SMA表达最低(P<0.05)。(2)实时荧光定量PCR检测显示各实验组肝脏组织内TGF-β1m RNA、b FGFm RNA和α-SMAm RNA的水平均较同期对照组低(P<0.05),A、B、C三大组实验组作单因素方差分析SNK检验进行均数的两两比较,结果显示早期肝纤维化实施脾切除术,肝脏组织内TGF-β1m RNA、b FGFm RNA和α-SMAm RNA水平最低(P<0.05)。结论:1.随着肝纤维化的发展,大鼠肝脏组织内TGF-β1、b FGF和α-SMA的表达及TGF-β1m RNA、b FGFm RNA和α-SMAm RNA水平逐渐增高。2.脾切除可明显降低肝内TGF-β1、b FGF和α-SMA的表达,延缓肝纤维化的发展。脾脏在肝纤维化发生发展中起重要作用。3.肝纤维化早期行脾切除术较中晚期延缓肝纤维发展效果明显。