电纺PLCL/丝素管状支架的制备、表征以及在血管组织工程中的应用

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近几年来,人类的健康正受到高发病率的心血管疾病的威胁,对于血管疾病的患者,通过冠状动脉搭桥等修复再生血管组织的方式进行治疗。但这类治疗方式受到治疗费用高等因素制约,所以人工仿制的血管支架移植成为当前解决该问题的新方法。现在,大直径的血管支架被较成功地应用,但小口径人工血管支架在应用方面仍存在血栓形成、通畅率低等缺陷。因此,改善小口径血管支架力学性能和提高管状支架的生物相容性,在临床应用上小口径血管支架的发展潜力才能得到挖掘。本论文采用同轴静电纺丝技术制备壳、芯层分别为PLCL/SF、肝素的功能性纳米纤维管状支架,作为双层血管支架的内层;通过共轭静电纺丝技术制备PLCL/SF纳米纱线管状支架,作为双层血管支架的外层,结合了天然材料与合成材料的优点,并且具有壳-芯结构的纳米纤维可以让肝素缓慢释放出来,从而达到长期抗凝血的目地。并对支架的机械性能、生物相容性等表征。具体内容如下:(1)首先利用静电纺丝技术制备PLCL、PLCL/SF、PLCL/SF/Hep、PLCL/Hep纳米纤维膜、PLCL/SF纳米纱线膜和单电纺PLCL/SF、单共轭PLCL/SF、单电纺PLCL、单共轭PLCL和双层PLCL/SF/Hep+PLCL/SF管状支架,双层PLCL/SF/Hep+PLCL/SF双层管状支架外层为绕轴取向排列的纳米纱线,且结构疏松具有大孔,有利于平滑肌细胞沿着取向排列的孔洞增殖生长。内层为致密层,并且纳米纤维是壳—芯结构,达到缓释肝素的作用,防止突释,可以长期起到抗凝血的作用。另外PLCL/SF/Hep+PLCL/SF双层管状支架能够很好的的模拟天然血管支架的细胞外基质的成分与结构。PLCL/SF/Hep+PLCL/SF双层管状支架亲水性能优良,这将有利于细胞粘附和增殖。并且双层PLCL/SF/Hep+PLCL/SF管状支架的力学性能十分优良,接近天血管,达到可以作为天然血管支架的要求。(2)在血液相容性测试中,从血浆复钙的结果中可以看出,PLCL/SF/Hep双层管状支架不会因材料引起急性凝血。PLCL/SF/Hep双层管状支架的血小板黏附在与对照组相比,效果显著。此外,HUVECs和HSMCs在支架上均有良好的粘附、铺展和增殖。HUVECs在支架可以形成细胞层,这对实现完整血管功能有重要意义。同时,HSMCs的增殖可以促进血管再生,为血管提供收缩和舒张所需的弹性。此外,在皮下包埋实验中,PLCL/SF/Hep+PLCL/SF双层管状支架有利于细胞长入。(3)PLCL/SF/Hep+PLCL/SF双层管状支架通过各项表征检测说明实验组支架有利于管状支架内层内皮化,从而达到抗凝血的作用;支架外层疏松且绕轴取向排列的纳米纱有利于平滑肌细胞的增殖生长,从而使管状支架的力学性能与天然血管支架的力学性能相匹配。综上,PLCL/SF/Hep+PLCL/SF双层管状支架在血管支架中具有很好的发展潜力。
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