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雷氏大疣蛛是分布于我国广西省的一种异纺蛛科的蜘蛛新种,主要以昆虫等为食。它的毒液是由小分子物质、多肽和大分子蛋白质组成的复杂混合物。为了从其毒腺中克隆出更多的编码毒素多肽的基因,丰富雷氏大疣蛛的毒素多肽信息,以期望能够在其毒素宝库中挖掘出具有药用前景的多肽分子,我们构建了雷氏大疣蛛毒腺的全长定向cDNA文库,文库滴度为1.0×106 cfu/ml(1ml原始文库菌液中含有大约106个转化子),基本上能够达到低丰度的信使RNA(mRNA)在cDNA文库中都能找到一个克隆的要求。通过随机测序,我们总共获得了492条表达序列标签(EST)。通过聚类分析,我们可以将这些EST归类为43个重叠群(每个重叠群含有两个或两个以上的EST)和112个单一序列(只含有一条EST)。通过生物信息学分析,492条EST序列中有303条EST编码毒素多肽,占总EST数目的62%；49条EST编码蜘蛛体蛋白,占总EST数目的10%；还有140条EST序列与数据库无明显比对结果,占总EST数目的28%。编码毒素的序列经过去冗余后,总共获得114条非冗余的类毒素前体肽,其中包含68条类毒素成熟肽。根据序列相似性和二硫键排列的差异性,我们将这些类毒素前体肽划分为十四个超家族,即超家族I-XIV。将这些超家族成员与NCBI数据库中的已知的核酸和蛋白质数据库进行了BLAST比对,对这些超家族成员的毒素进行了功能预测分析,为后续的雷氏大疣蛛的功能活性分析研究奠定了基础。本文还将雷氏大疣蛛cDNA文库中的非毒素成分的蛋白质进行了GO注释分析,分析了这些蛋白质的功能,发现了一些与蜘蛛自身生活相关的蛋白质,为研究蜘蛛毒液的组成奠定了基础。