草莓属物种5S和45S rDNA的比较定位

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在世界范围内分布的草莓属植物大约有25种,多数物种是二倍体(2n=2x=14),多倍体主要包括四倍体、六倍体和八倍体,还有少部分五倍体,九倍体和十倍体等。其中许多物种的果实是可食用的,尤其是栽培种草莓在经济上具有重要价值。进行草莓属植物的亲缘进化研究有助于我们选择野生种中优良的基因导入栽培种草莓中。染色体核型分析是探明物种间亲缘进化关系的有效方法,然而,草莓属植物染色体小、形态相近,多倍体种染色体数目多,以传统方法进行准确的核型分析几乎是不可能的。本研究结果表明用染色体特异的寡核苷酸库(oligo)作为探针可以识别出草莓属植物的单条染色体,利用合成的森林草莓6条染色体的寡核苷酸库及5S和45S rDNA作为荧光原位杂交的探针做了如下工作:(1)在同一个森林草莓的中期细胞上依次进行两轮多色FISH分析,每轮杂交使用3个探针库,同时识别了森林草莓的所有染色体。构建了森林草莓有丝分裂中期染色体的核型,这是森林草莓第一个基于FISH的分子细胞遗传学核型。(2)通过利用6个寡核苷酸库、45S和5S rDNA探针对同一制片进行三次杂交,确定森林草莓中45S和5S rDNA分布位置和数目的基础上,确定了目前搜集到的所有草莓属物种45S rDNA和5S rDNA的分布特征。发现在7个二倍体草莓种中,45S rDNA都位于1号、2号和7号染色体短臂末端,5S rDNA位于7号染色体上靠近45S rDNA的内侧。但在黄毛草莓中45S rDNA仅位于1号和7号染色体上,在日本草莓中1号染色体的一对同源染色体上仅一条染色体上有45S rDNA分布。几个二倍体种中同源染色体上45S rDNA信号强度有明显差异,表明草莓属二倍体物种的45S rDNA位点处于一种动态变化的过程中。(3)确定了9个多倍体物种(包括4个四倍体种、1个六倍体种、3个八倍体种和1个十倍体种)45S和5S rDNA的分布,根据寡核苷酸库探针信号的强度、染色体的长短以及45S和5S rDNA在多倍体与二倍体种中分布的异同,探讨了多倍体草莓基因组的性质(同源或异源)及起源。本研究为野生草莓资源的识别鉴定及合理利用提供了有效的方法,也为通过种间杂交、人工合成异源多倍体等技术改良培育草莓新品种提供了理论依据。
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