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人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的表达可通过激活端粒酶促进正常细胞恶性转化为肿瘤细胞，在恶性肿瘤的发生和发展过程中起着至关重要的作用。单核苷酸多态性(SNPs)是遗传易感的重要物质基础之一，目前对hTERT基因上的SNPs与肝癌易感性间的关系的研究尚无报道。本研究选择hTERT基因Ex2-659G>A多态性位点为研究对象，探讨其与我国汉族人群肝癌易感性之间的关系。
本研究采集肝癌患者血样132例，其中男性101例，女性31例。健康成人对照组血样84例，其中男性44例，女性40例。另取南开大学校医院健康查体学生131例作为验证组。应用改良的饱和酚氯仿法提取非抗凝血中全基因组DNA，并与其它提取DNA的方法进行了比较。在hTERT基因Ex2-659G>A多态性位点两侧选取特异性高的引物对，得到较为稳定的PCR产物(379 bp)。应用限制性内切酶PspOM I酶切PCR产物，采用PCR-RFLP的方法检测该多态性位点基因型，并用DNA测序的方法对基因型结果进行验证。全部检测人群基因型频率均符合哈迪.温伯格平衡，具有群体代表性。验证组和NCBI上所收录的HapMap上中国汉族人群相比，hTERT基因Ex2-659G>A多态性位点在两组人群基因型频率分布与等位基因频率分布基本一致，无统计学差异(P分别为0.553和0.765)，说明实验采用的PCR-RFLP基因型检测方法可靠。病例组和对照组人群比较，两组基因型的分布(P=0.234)和G、A等位基因型的频率(P=0.114)差别均不显著。分析性别因素对两组间基因型分布和等位基因频率的影响，发现病例组女性和对照组女性间有一定的差异(P分别为0.063和0.059)；与GG基因型相比，GA和AA基因型的女性患肝癌的危险度OR值分别为1.888(95％ CI:0.644～5.539，P=0.247)和11.429(95％CI:1.119～116.7，P=0.04)。与野生型等位基因G相比，携带有A等位基因的女性患肝癌的危险度为1.933(95％ CI:0.972～3.844，P=0.059)。显示该多态性位点可能与中国汉族人群女性的肝癌易感性相关，即hTERT基因Ex2-659G>A多态性位点可能增加中国汉族人群女性罹患肝癌的风险性。本实验采用的改进饱和酚-氯仿法非抗凝血基因组DNA提取方法，具有成本低、提取量大、无需额外抽血取材的优点。