桂枝主要抑菌活性成分对‘新余蜜橘’青霉病抑菌机理及其保鲜效果的研究

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新型、无毒且高效的天然杀菌剂是近年来国内外研究领域的一大热点。本实验基于课题组前期对桂枝主要抑菌活性成分的分离鉴定结果:肉桂醛和肉桂酸,以一种柑橘采后主要病原菌—意大利青霉菌为供试菌种,并以中草药桂枝为试材,进一步对桂枝主要抑菌活性成分的抑菌广谱性、抑菌机理及其对‘新余蜜橘’果实的生防效果和贮藏保鲜效果进行研究,以期为天然杀菌物质替代化学杀菌剂奠定一定的理论基础,并为今后中草药及其活性物质在柑橘等果蔬病害防治及贮藏保鲜方面提供一定的参考价值。主要研究结果如下:1、利用二倍稀释法和菌丝生长速率法,以柑橘青、绿霉病菌及西瓜枯萎病菌等15种常见植物病原菌作为指示菌种,测定了中草药桂枝的两种主要抑菌活性成分肉桂醛和肉桂酸的室内毒力。结果表明,肉桂醛和肉桂酸对供试的15种植物病原菌均表现了不同程度的抑制作用,说明二者具有抑菌广谱性。其中肉桂醛对猕猴桃拟茎点霉菌Phomopsis sp.的抑制效果最好,EC50为0.0179 mg/mL,对柑橘指状青霉菌Penicillium digitatum的抑制效果最差,EC50为0.7551 mg/mL;肉桂酸对枣拟茎点霉菌Phomopsis mauritiana和葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea的抑制效果最好,EC50均为0.0061 mg/mL,对柑橘指状青霉菌Penicillium digitatum的抑制效果最差,EC50为0.9945 mg/m L。2、以意大利青霉菌Penicillium italicum为供试菌,通过测定肉桂醛、肉桂酸对供试菌种的孢子萌发、菌丝生长形态、细胞膜的通透性、可溶性糖和蛋白质含量以及代谢关键酶活性的影响,以阐明两种主要活性物质的抑菌作用机制。研究发现,肉桂醛溶液对意大利青霉菌的MIC、MFC分别为0.025 mg/mL和0.1 mg/mL,肉桂酸溶液对意大利青霉菌的MIC、MFC分别为0.1 mg/mL和0.4 mg/mL。结果表明,肉桂醛和肉桂酸均能有效地抑制病原菌的孢子萌发,使菌丝畸形或断裂,破坏细胞膜完整性,增加其通透性,致使内含物质外渗,且能有效抑制琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)活性,使菌体能量代谢途径受阻,从而有效抑制其正常的生长发育。3、根据500倍和1000倍咪鲜胺稀释液对‘新余蜜橘’果实损伤接种后的防护效果确定最佳肉桂醛和肉桂酸抑菌浓度,分析了25 mg/mL和8 mg/mL肉桂醛以及30mg/m L和15 mg/mL肉桂酸对‘新余蜜橘’活体防效和防御酶体系的影响。结果表明,与对照组相比,不同浓度肉桂醛和肉桂酸处理都能显著降低果实发病率和病情指数(p<0.05),有效增强果实活体防护效果;且各处理能减小营养成分的消耗,抑制MDA和H2O2含量积累,并显著提高且维持较高的SOD、PAL、PPO和POD活性,诱导并增强果实的抗病能力。试验以高浓度即25 mg/mL的肉桂醛和30 mg/mL肉桂酸处理的效果最佳。4、以‘新余蜜橘’为试材,研究了在贮藏温度为(5±1)℃,相对湿度(RH)为85%~90%的条件下,100 mg/mL桂枝提取液对‘新余蜜橘’果实贮藏保鲜效果的影响。结果表明,与对照相比,贮藏中后期,桂枝提取液浸果处理能显著减少烂果数,降低果实失重率和MDA含量,延缓TSS、总糖、VC及TA含量的降解速率,维持贮藏后期较高的CAT、SOD、PAL、POD以及PPO活性,具有较好的贮藏保鲜效果。5、以桂枝提取液及其复合膜对‘新余蜜橘’果实进行涂膜处理,研究常温贮藏条件下的保鲜效果。结果表明,与对照组相比,各处理组均能有效地降低贮藏过程中果实的失重率和腐烂率,延缓果实TSS、VC及总糖含量峰值的到达及其含量的下降,降低TA的降解速率;各处理组在贮藏期间均可抑制MDA含量的积累,维持果实贮藏后期较高的SOD、CAT、POD活性,延缓PAL及PPO活性峰值的到达且均与对照组差异显著,以100 mg/mL桂枝提取液复合1.5%海藻酸钠和700 mg/L柠檬酸涂膜处理效果最好。
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