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小反刍兽疫PPR(Peste des Petits Ruminants,PPR)是由PPRV(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)引起的高致病性疫病,死亡率达50-80%。是世界动物卫生组织(Office International des Epizooties,OIE)规定必须报告的烈性动物传染病。PPRV对宿主的天然免疫抑制非常严重,但目前关于宿主对PPRV感染的天然免疫应答过程、抗病毒药物以及新型抗病毒技术开发等方面的研究不多。本文对上述问题进行了初步研究,取得如下结果: 1.PPRV在遗传进化过程中,其密码子使用模式受到基因组自身突变压力以及与宿主相关的翻译选择压力的影响。N蛋白作为一种重要的病毒复制相关蛋白,其编码基因高度适应宿主密码子使用模式,并且在形成正确的蛋白结构的过程中,其密码子使用偏嗜性以及宿主细胞tRNA丰度变化都受到影响。N蛋白在PPRV复制过程中发挥着重要作用,其蛋白高级构象的形成与密码子使用模式具有明显的相关性。 2.PPRV感染HEK293T细胞后可诱导细胞内IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3三种干扰素及ISG15、ISG56、CXCL10等几种抗病毒蛋白(ISG)的表达,外源加入IFN-alpha-2b及IFN-λ3后对PPRV复制有明显的抑制作用,而IFN信号通路抑制剂Jak-inhibitor,对宿主细胞自身产生的IFN的应答无抑制作用,反之,未感染PPRV的HEK293T细胞对外源加入的IFN的应答具有显著抑制作用。 3.PPRV感染细胞可以诱导宿主细胞自噬相关蛋白Atg13蛋白的表达,该蛋白可以激活Ⅰ型IFN及相关细胞因子的表达,这些表达产物同样具有抗病毒作用。此外,Atg13蛋白具有抑制PPRV的复制的功能,说明宿主Atg13蛋白除了具有自噬功能之外还具有激活天然免疫及抗病毒等其它重要功能。 4.病毒唑(Ribavirin)与霉酚酸(Mycophenolic)均具有显著的抗PPRV的作用,深入研究发现,Ribavirin通过抑制IMPDH酶的活性来阻止GTP pool的形成从而发挥抗病毒作用。 5.Vero细胞敲除Vinculin基因后,细胞的迁移率降低,PPRV在细胞中的复制效率也有所降低。 6.筛选到了抗PPRV感染的两种干扰素,初步分析了Ribavirin及Mycophenolic两种药物治疗PPRV感染的可能性,这也为藏羚羊等我国特有的珍稀小反刍动物感染PPRV后的治疗提供了可靠的依据。 以上研究结果为我们深入了解PPRV与宿主细胞天然免疫系统的相互关系奠定了基础,为PPR的防控提供了新的思路。