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大鲵(Andias davidianus)俗称娃娃鱼,属两栖纲,有尾目,隐鳃鲵科,是世界上最大的珍稀两栖动物和国家二级保护动物。许多学者围绕大鲵的人工养殖和繁殖进行了大量地调查和研究工作,但对输卵管,精巢以及雄性生殖管道的基本组织结构和发育变化尚未见报道。在人工繁殖过程中,发现部分雌性大鲵排卵不顺畅以及产出许多形态不正常的胶膜卵,少数雄性大鲵排出死精子。这些不正常的现象直接影响大鲵的人工受精率。本文开展大鲵的输卵管,精巢以及雄性生殖管道的基本组织结构和发育变化的研究,对了解大鲵卵胶膜形成和精子排出过程,丰富精巢的生物学资料,提高人工繁殖受精率具有重要意义。大鲵的人工繁殖技术取得一定进展,但催产率、受精率和孵化率均较低。我们从亲本饲养模式、判断催产时机、受精稀释液对精子的影响、受精方法和孵化模式等4个方面进行了研究和探讨,以期完善大鲵的人工繁殖技术。结果如下: 一)输卵管的基本组织结构和发育变化 输卵管在性未成熟期,性成熟后的产卵期及退化期的发育形态有明显地区别。他们的组织结构特点如下: 1.不同时期的输卵管壁均由黏膜,肌层和浆膜3层构成,其主要区别在于黏膜的固有层内是否形成分泌腺。 2.产卵期输卵管明显分成伞部,中段和直段,其末端以尖端突入泄殖腔。 3.尖端突的横切面上首次发现有单管腺。其功能有待进一步研究。 二)精巢以及雄性生殖管道的基本组织结构和发育变化 大鲵精巢的表面覆以浆膜,其实质由精细管和精细管之间的疏松结缔组织构成。精巢成熟时,在精巢腹面的纵沟内,精细管相互吻合形成精巢网。从精巢纵沟内伸出一排细长的输出小管。输出小管汇合后进入附睾管。附睾管为一条极度蟠曲的管道,下端与输精管相连。输精管末端以尖端突入泄殖腔。 1.在Ⅳ期精巢内,精细管包含有精原细胞、初级精母细胞、少量精子细胞和支持细胞。同步发育的性细胞群成团分布。支持细胞位于性细胞团的外缘,对生精细胞起支持和营养作用;在V期精巢内,精细管由大量的精子、少量的精子细胞和支持细胞构成。支持细胞体积较大,内含颗粒,能吞噬和消化精子形成过程中脱落下来的残余胞质。精细管的基膜外侧有一圈梭形肌样细胞。精细管之间的间质为疏松结缔组织,富含血管。间质中存在一种间质细胞,成群分布,核圆居中,胞质嗜酸性强。 2.大蜕的雄性生殖管道系统包括4种管道。生殖殖季节时,①精巢网的管腔狭长,腔内充满上皮细胞;②输出小管的豁膜上皮呈指状突起,腔内充满脱落的上皮细胞和分泌物;③附皋管的管腔较圆且小,腔内充满脱落的上皮细胞和分泌物;④输精管的豁膜上皮呈指状突起,肌层明显。在性未成熟时期和退化时期,附皋管消失,其他各管道变小,勃膜上皮不形成突起。 3.在输精管及其尖端突的横切面上发现有单管腺。其功能有待进一步确证。三)关于人工繁殖技术的研究和探讨 三年来对大织人工催产技术进行了试验和探讨,确定了单池饲养模式,首次提出根据大织体重变化来判断催产时机,试验了三种混合液对大鱿精子运动寿命的影响,改进了人工授精以及孵化器孵化技术,成功地孵化出了幼蜕。 1.与大池饲养模式相比,在单池饲养模式下大蜕体重增长显著,死亡率降低,便于管理。 2.资料分析表明,大蜕的群体体重变化情况为确定大织的催产时机提供了客观依据。我们提出根据每个亲本的体重周年变化情况来判断最佳催产期。 3.低浓度的Ho If氏原液和井水(浓度待测)能明显促进精子运动;较高浓度的Ringer氏原液妨碍精子运动。 4.用干湿法授精,添加精子稀释液。受精后把卵带平铺到平底孵化筛内,增开充氧机和微流水,挑出坏卵。