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本文分为以下两个部分进行探讨： 第一部分 miR-221在肝癌组织中高表达,且其含量与肿瘤恶性程度正相关 背景：MiRNA表达异常与肿瘤发生发展密切相关，miR-221在胃癌，结肠癌，食管癌，胰腺癌中高表达，其在肝癌中的表达量及其生物学效应有待进一步探索。 目的：研究肝癌中miR-221表达量及其对肿瘤侵袭及转移能力的影响。 方法：用实时定量PCR检测肝癌组织及正常肝组织中miR-221的表达量，系统分析 miR-221表达量与肿瘤大小，淋巴结转移，微血管浸润及患者预后等临床指标的关系。在肝癌细胞系中过表达外源性 miR-221或抑制细胞内miR-221并观察肿瘤侵袭与转移功能的变化。 结果：肝癌中miR-221表达升高，且miR-221含量与肿瘤大小，淋巴结转移及微血管浸润正相关。在肝癌细胞系中，上调 miR-221可促进肿瘤的浸润及转移，抑制 miR-221可起到相反作用。我们进一步发现，在肝癌细胞系中上调 miR-221可促进肿瘤发生上皮-间质转化，抑制 miR-221可起到相反作用。 结论：肝癌中 miR-221高表达，其表达量与肿瘤恶性程度正相关，在肝癌细胞系中过表达miR-221可促进肿瘤发生上皮-间质转化，促进肿瘤浸润及转移，抑制miR-221可起到相反作用。 第二部分 miR-221通过抑制AdipoR1促进肝癌细胞发生上皮-间质转化 背景：miR-221可通过抑制PTEN，PDLIM2，P27等促进肿瘤增殖，AdipoR1是脂联素最重要的受体之一，抑制AdipoR1可能促进肿瘤发生上皮-间质转化。 目的：研究miR-221是否可通过抑制AdipoR1促进肝癌细胞发生上皮-间质转化并探索相关机制。 方法：过表达或抑制miR-221后观察AdipoR1 mRNA及蛋白的改变，双荧光素酶实验验证miR-221是否可结合于AdipoR1 mRNA的3’非编码区并发挥转录后调控。抑制或过表达 AdipoR1，观察肝癌细胞上皮-间质转化是否改变。过表达或抑制AdipoR1后观察与上皮-间质转化相关的信号通路的改变。 结果：过表达miR-221可下调AdipoR1的蛋白表达，抑制miR-221可上调AdipoR1蛋白表达，但AdipoR1 mRNA水平没有明显变化，双荧光素酶实验证实miR-221可结合于AdipoR1 mRNA的3’非编码区并抑制其活性。抑制AdipoR1可促进肝癌细胞发生上皮-间质转化，过表达AdipoR1可逆转由过表达miR-221所引起的肝癌上皮-间质转化过程。抑制AdipoR1可使磷酸化JAK及磷酸化STAT3表达升高，过表达AdipoR1起相反作用。 结论：miR-221可通过抑制AdipoR1 mRNA的翻译促进肝癌细胞发生上皮-间质转化。