【摘 要】
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新城疫病毒是危害世界养禽业最主要的病毒之一,新城疫病毒的危害性因毒株的不同而呈现出一定的差异。外周血是新城疫病毒在机体内传播重要的载体,同时外周血淋巴细胞也通过表
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新城疫病毒是危害世界养禽业最主要的病毒之一,新城疫病毒的危害性因毒株的不同而呈现出一定的差异。外周血是新城疫病毒在机体内传播重要的载体,同时外周血淋巴细胞也通过表达细胞因子控制病毒在体内的传播。为了解新城疫病毒强毒株与弱毒株在外周血中的载量变化规律以及不同毒力的新城疫病毒感染所引起的外周血淋巴细胞中细胞因子的差异表达状况,在本研究中,使用了新城疫病毒强毒株F48E9株与弱毒株Lasota株分别感染SPF成年鸡,同时使用一组未感染病毒的成年鸡作对照。在感染后0天、3天、7天、10天、14天、21天这6个时间点分别采集三组成年鸡的外周血,进行外周血总RNA的提取并且反转录,最后使用Real-time PCR技术对IFN alpha、IFN gamma、IL-2、IL-6、IL-10、IL-13、IL-15、IL-16、IL-18这9种细胞因子mRNA以及新城疫病毒F48E9毒株与Lasota毒株在外周血中的载量进行检测。实验结果表明,新城疫病毒F48E9株在外周血中的载量在感染病毒后迅速升高,在感染后7天达到峰值,拷贝数为8.56×106copies/mL,而后又迅速下降。与之相比,新城疫病毒Lasota株在外周血中的载量在感染后上升缓慢,于感染后10天达到峰值,拷贝数为6.60×106copies/mL,之后在外周血中的载量缓慢下降。两毒株相比,F48E9株的峰值高于Lasota株的峰值,且F48E9株峰值出现早于Lasota株峰值出现时间。在细胞因子表达检测方面,无论新城疫病毒F48E9株还是新城疫病毒Lasota株均能够引起IFN-γ在感染后的高效的表达,且其各自峰值与对照组相比呈现显著差异;新城疫病毒F48E9毒株与新城疫病毒Lasota毒株相比,更能够迅速的诱导外周血淋巴细胞当中IFN-α与IFN-γ表达,且F48E9毒株与Lasota毒株相比F48E9诱导IFN-α表达的能力更强,而Lasota株诱导IFN-γ表达的能力更强。IL-2的mRNA的表达情况有所不同,仅Lasota株能够诱导其高效表达且其峰值与对照组相比呈现显著差异,而F48E9株对IL-2的诱导效应不明显;与之相反,IL-10、IL-16、IL-18这三种细胞因子仅F48E9株能够诱导高效表达且其峰值与对照组相比呈现显著差异。同时在研究中还发现无论是F48E9株还是Lasota株均能够诱导IL-13的高效表达,而二者对IL-15表达诱导的峰值与对照组相比无显著差异。在实验中还发现在感染了新城疫病毒的成年鸡外周血中各个时间点均不能检测到IL-6的mRNA表达,而在各个时间点的对照组成年鸡外周血中却能够检测到IL-6的mRNA表达。实验证明,F48E9在外周血中载量的变化呈现上升迅速而下降迅速的趋势,而Lasota在在外周血中载量的变化呈现上升缓慢而下降迅速的趋势,F48E9毒株感染的成年鸡在外周血中载量的峰值时间先于并高于Lasota毒株感染的成年鸡。在新城疫病毒感染过程当中,各个细胞因子的表达在F48E9毒株与Lasota毒株之间存在一定的差异,可能与感染病毒的毒力以及外周血中病毒载量变化存在一定的关系。
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