H7N9流感病毒亚单位疫苗的研制

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自从2013年3月份在安徽发现了首例感染H7N9流感病毒的患者后,截止到目前为止,H7N9流感病毒截止到目前为止已经进行了五次的流行。通过对不同波次毒株的基因的分析,发现H7N9流感病毒的基因类型主要通过基因突变和重组在进行变异,其中前四次流行的毒株主要为低致病性禽流感流感病毒,第五次流行为高致病性禽流感流感病毒(highly pathogenic avian influenza virus,HPAIV),第五次流行范围已经扩大至全国范围(除了宁夏、海南、青海)。综上所述,H7N9流感病毒还在进行不断的变异,就目前的演变趋势来看,该病毒对于人类的威胁也越来越大,因此研制可以预防H7N9流感的疫苗迫在眉睫。本论文研究的是新型亚单位蛋白疫苗,选取LPAIV毒株A/Anhui/1/2013/H7N9和HPAIV 毒株 A/chicken/Guangdong/SZBJ0011/2017/H7N9 流感病毒膜上的 HA 蛋白作为疫苗的免疫原,考虑到亚单位蛋白疫苗的免疫效果较差,我们将HA重组蛋白和铝佐剂、MF59、弗氏佐剂、白油佐剂充分混合后免疫小鼠,疫苗免疫后采集小鼠血清,用血凝抑制和ELISA检测血清中的抗体含量,免疫攻毒后采集肺组织,用MDCK细胞检测肺组织中的病毒含量,攻毒后观察其体重变化率和存活率。结果表明,H7蛋白结合佐剂在加强免疫后能够引起机体较强的抗体水平,并消除小鼠肺组织的H7N9流感病毒并抑制病毒的增殖,进而保护小鼠在攻毒后,能够短时间内恢复到正常水平,同时从以上的实验结果也可以看出,不同佐剂之间的免疫效果无显著性差异。随之对2013anhui HA蛋白和2017BJ0011 HA蛋白设置了不同的免疫剂量,通过血凝抑制实验和ELISA实验检测免疫后的血清中的抗体含量以及攻毒后小鼠的体重变化和死亡率情况,说明了这两种HA蛋白的抗原没有剂量依赖性。
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