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目的：胰腺癌作为转移侵袭能力极强、致死率极高的肿瘤,患者的预后往往不佳。DAB2IP作为一种RasGAP蛋白家族成员之一,在多种肿瘤中证明其发挥抑癌基因的作用。本研究旨在探讨DAB2IP对胰腺癌生长、转移及化疗抗性的作用及机制,从而为治疗胰腺癌探索新的靶点。方法：1.探讨DAB2IP影响胰腺癌生长能力的体内外研究：首先,临床胰腺癌标本中分析DAB2IP表达的差异及与临床病理学资料的相关性,重点分析其与胰腺癌预后的关系；然后,利用胰腺癌内源性表达DAB2IP不同的细胞系分别转染过表达及低表达质粒,构建稳定高、低表达DAB2IP的细胞；其次,分别应用细胞增殖、凋亡实验、平板克隆及软琼脂克隆实验证明其对胰腺癌细胞体外生长的作用；最后,利用胰腺癌皮下移植瘤模型,分析DAB2IP对肿瘤生长的影响,并分析其可能的机制。2.探讨DAB2IP影响胰腺癌转移能力的体内外研究：首先,我们应用构建好的DAB2IP稳定高/低表达细胞系,利用划痕实验、Transwell侵袭迁移实验检测细胞体外转移能力的改变；然后,分别利用Western-blot和PCR技术检测EMT相关蛋白及相关转录因子的变化；其次,分析DAB2IP对调控转移的关键信号通路的作用：最后,利用尾静脉注射胰腺癌细胞建立的肺转移模型,分析DAB2IP对肿瘤体内转移情况的影响。3.探讨DAB2IP对胰腺癌化疗敏感性的研究：首先,检测常规一线化疗药物吉西他滨在胰腺癌中的IC50,以此浓度作用于上述两组稳定株细胞,检测细胞活力的改变分析DAB2IP是否增强胰腺癌对吉西他滨药物的敏感性；其次,我们检测新型化疗药物盐霉素的IC50,同样作用于上述两种稳定株细胞分析DAB2IP与盐霉素对胰腺癌细胞的活力的影响；然后,我们利用Realtime-PCR检测DAB2IP与化疗多重耐药相关基因的作用；最后,我们利用Western-blot分析DAB2IP对胰腺癌干细胞相关标记分子的影响。结果：1.DAB2IP抑制胰腺癌体内外生长情况：①利用免疫组化分析96例胰腺癌患者标本中DAB2IP的表达情况显示,胰腺癌组织中DAB2IP的表达明显低于癌旁组织；124例胰腺癌患者临床标本中DAB2IP的表达与肿瘤的病理分级、淋巴结转移的有无存在明显的相关性：我们进一步首次分析99例胰腺癌患者预后与DAB2IP表达的关系后发现,DAB2IP的表达缺失是胰腺癌预后较差的重要预测因子。②检测胰腺癌细胞检测内源性DAB2IP表达情况,转染已有DAB2IP干扰质粒及过表达质粒构建稳定改变DAB2IP表达的细胞,发现DAB2IP可以抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,同时DAB2IP可以抑制细胞贴壁性及非贴壁性克隆的形成能力。③建立胰腺癌皮下移植瘤模型,发现DAB2IP可以抑制胰腺癌细胞体内生长,其可能是通过诱导肿瘤组织细胞凋亡、抑制增殖来实现的。2.DAB2IP对胰腺癌体内外转移情况的影响：①细胞划痕、Trans well侵袭迁移实验显示,DAB2IP可以抑制胰腺癌细胞体外迁移和侵袭能力。②WB实验提示DAB2IP在胰腺癌可能通过抑制EMT的过程发挥抑制转移的功能的,并与转录因子Slug表达改变密切相关：Luciferase实验进一步验证了DAB2IP可以抑制Slug的转录活性。③检测调控EMT发生的重要信号通路关键蛋白表达发现,DAB2IP可以抑制STAT3、Akt的激活,并首次发现其可以抑制Smad2/3的磷酸化水平继而参与TGF-β信号通路的调控。3.DAB2IP对胰腺癌化疗敏感性的作用：①发现DAB2IP可以抑制胰腺癌细胞对一线化疗药物的吉西他滨的抗性,也可以协同促进对新型化疗药物盐霉素对胰腺癌细胞的敏感性。②DAB2IP可以抑制多重耐药相关基因特别是ABCC1基因的表达。③DAB2IP可以抑制胰腺癌干性标记分子,特别是CD133蛋白的表达。结论：DAB2IP作为一种肿瘤抑制基因,分别通过抑制胰腺癌的生长、转移、化疗抗性等方面发挥作用,其可能与抑制Slug的转录或激活、ABCC1等耐药基因、CD133等干性基因的表达有关,可以为未来临床治疗胰腺癌提出新的思路。