抑制细胞外信号调节激酶对三氧化二砷诱导胃癌细胞MGC-803凋亡的作用

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tcwf2009
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前言 自70年代以来,我国学者应用三氧化二砷(As2O3)治疗急性早幼粒细胞白血病,取得良好的疗效,其主要机制是诱导细胞凋亡。胃癌是我国最常见的恶性肿瘤,对化放疗敏感性均低,生存期短,死亡率高。近几年,大量文献报道,As2O3可以抑制胃癌细胞生长,其具体机制主要通过诱导胃癌细胞凋亡和细胞周期阻滞实现的。细胞外信号调节激酶(ERK)是丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)家族的一个亚族,该信号途径及其上游激酶被生长因子相关刺激激活,将信号传导至细胞核,并引起与细胞增殖有关的基因表达增加。近来有报告表明抑制ERK1/2活性与诱导细胞凋亡有关。 本研究的目的是通过检测抑制ERK对As2O3诱导的胃癌细胞凋亡有无影响,探讨ERK在As2O3诱导胃癌细胞凋亡的信号转导途径中的作用。 方法 1.主要试剂 RPMI1640购自Gibco,As2O3购自哈尔滨伊尔达药业公司,细胞外信号调节激酶抑制剂(PD98059)购自Promega,碘化吡啶(PI),RNAse为Fluka公司产品,0.25%胰蛋白酶为华美生物公司产品。 2.实验仪器 5%二氧化碳培养箱,超净工作台,酶标仪,LTX2.5细胞涂片机,流式细胞仪(型号为FACScan,B.D.公司),倒置显微镜。 3.细胞培养 胃癌细胞系MGC-803为本实验室常规传代培养细胞系,采用含10%小牛血清的RPMI1640培养液,于37℃,体积分数5%CO2,饱和湿度的培养
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