有序介孔材料对脂肪酶的固定及对药物控释的研究

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以三嵌段共聚物P123为模板剂,以正硅酸乙酯(TEOS)为硅源,在酸性条件下以水热法合成了有序介孔二氧化硅材料SBA-15,然后以(3-氨丙基)三乙氧基硅烷(APTES)为改性剂通过后接枝的方法对SBA-15进行表面改性处理,得到改性材料NH-SBA-15。用扫描电子显微镜(SEM)和能量分散X-射线光谱(EDS)、透射电子显微镜(TEM)、小角X射线衍射(SAXRD)、N2吸附-脱附等温曲线以及傅里叶变换红外光谱(FT-IR)等手段对合成的材料进行表征分析。结果显示SBA-15具有2D六方状p6mm排列的介观结构,且材料经表面改性后仍能保持此有序的介观结构。以介孔材料SBA-15和NH-SBA-15为载体对猪胰脂肪酶(PPL)进行固定化研究,详细探究了固定化PPL催化三乙酸甘油酯水解的性能。结果显示固定化PPL较自由PPL具有更优异的pH适应性和高温耐性,同时具有较好的重复利用性;并且固定化酶样品NH-SBA-15-PPL较SBA-15-PPL具有更高的酶固定量和催化活性,同时显示出更好的重复利用性,在重复利用5次之后,NH-SBA-15-PPL的相对酶活仍能保持其最初值的49.13%,而SBA-15-PPL的相对酶活仅剩余41.96%。在APTES/TEOS的不同摩尔比率(5 mol%,10 mol%和15 mol%)下,使TEOS与APTES在水热条件下共缩聚合成出改性介孔材料NH-5/SBA-15,NH-10/SBA-15和NH-15/SBA-15。以SAXRD、SEM、TEM、N2吸附-脱附等温曲线和FT-IR等表征手段来检测改性处理对SBA-15结构特性的影响。表征结果显示改性SBA-15的结构有序性及其孔径、孔体积和比表面积都随着APTES添加量的增加而减小。以合成的介孔材料为载体对假丝酵母脂肪酶(CRL)进行固定化的研究,对比了其对CRL的固定量并测试了固定化CRL的催化性能。实验讨论了反应体系的pH和温度对固定化CRL催化三乙酸甘油酯水解的影响,结果显示固定化CRL具有较好的pH和温度适应性,并且改性后的SBA-15固定化CRL较自由CRL具有更高的催化活性,其中NH-5/SBA-15固定化CRL的催化活性最高。但是NH-15/SBA-15固定化CRL的高温耐性和重复利用性最好,在60℃水浴中保温120 min后仍能剩余87.50%的相对酶活,在经过6次的重复利用实验后仍保留有67.13%的相对酶活。以改性前的有序介孔材料SBA-15和共缩聚改性后的介孔材料NH-5/SBA-15,NH-10/SBA-15和NH-15/SBA-15为载体,研究了其对非水溶性药物大黄素的控释性能。N2吸附-脱附等温曲线分析结果显示大黄素分子已固定到介孔载体材料的孔道当中,并且其在载体中的固定量按照SBA-15、NH-5/SBA-15、NH-10/SBA-15、NH-15/SBA-15的顺序依次降低。在磷酸盐缓冲溶液(PBS,pH = 7.4)中对固定化大黄素进行了体外控释实验,结果显示在控释刚开始时,所有样品均表现出“突释”的现象,而控释进行3 h后药物释放速率均变慢,其中改性介孔材料载体固定化大黄素具有更慢的释放速率。当在PBS中的控释时间为60 h时,载药样品NH-10/SBA-15中的大黄素释放量最小,仅为71.74%。表明改性介孔SBA-15材料具有作为药物控释载体方面的应用潜力,能有效的延长药物的释放时间。
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