背景:GTPBP4由633个氨基酸组成的定位于核仁的新型G蛋白,主要参与60S亚单位的合成。已有研究表明,GTPBP4是参与调节细胞的生长和发展的重要节点,并发现该蛋白和p53蛋白相互作用,沉默该基因表达后引起p53蛋白积聚,细胞周期停滞;该蛋白在神经胶质瘤施旺细胞中表达下调,和Merlin蛋白作用抑制细胞聚集和生长,充当抑癌基因角色。为探讨该蛋白和HCC发生发展是否有关联,本研究将进行如下实验:目的:检测GTPBP4基因在HCC组织蛋白水平表达情况,探讨观察沉默肝癌Hep G2细胞GTPBP4基因表达后细胞增殖、细胞周期变化,并研究生物学行为变化的分子机制,为肝癌治疗提供新思路。方法:应用Western blot在蛋白水平检测GTPBP4在临床24例配对HCC组织、配对癌旁组织中表达量差异。在肝癌Hep G2细胞中采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默GTPBP4基因表达,用倒置荧光显微镜下观察感染效率,通过实时荧光定量PCR、Western blot方法检验沉默效果。应用流式细胞仪、CCK-8实验观察GTPBP4基因沉默后细胞周期、细胞增殖变化;采用Western blot方法检测GTPBP4基因沉默后p53、p21蛋白水平变化。结果:1.Western blot显示GTPBP4在21例(87.5%)HCC组织中高表达,余3例配对组织表达无差异.2.采用慢病毒介导RNAi干扰后,用荧光显微镜下观察GFP表达情况,90%细胞发出绿色荧光,感染效率高;实验组能有效的下调GTPBP4的mRNA和蛋白水平。3.通过流式细胞仪检测细胞周期,实验组G0/G1期增多,S期减少,细胞停滞于G0/G1期;通过CCK8法检测细胞增殖能力,实验组增殖能力明显抑制,96h抑制率达54.51%。特异性沉默GTPBP4基因后,Western Blot检测发现p53、p21蛋白却增加了。结论:GTPBP4表达水平在临床肝细胞肝癌组织中明显高于配对癌旁肝组织,利用RNAi干扰GTPBP4基因表达后,肝癌HepG2细胞增殖能力明显下降,细胞周期停滞于GO/G1期,可能通过某种机制引起细胞周期相关蛋白p53、p21增加。