LMO2隶属于LMO家族，其基因定位于人类11号染色体短臂1区3带(11p13)，最早是从带有染色体易位t(11；14)(p13；q11)的急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者病变细胞的染色体断裂点处克隆得到的。LMO2基因对红系细胞和T淋巴系细胞的分化和发育都具有重要的作用。　　 具体来说，LMO2属于具有锌指结构域的转录调控因子，具备特征性的LIM结构域，它的功能主要是通过调控其下游靶基因的表达来实现的。已有的研究已经表明，LMO2本身缺乏直接结合DNA的能力，通常作为桥梁分子通过LDB1将GATA-1、TAL1、E47等转录因子聚集形成一复合物，并结合于DNA上毗邻的GATA和E-box位点，发挥转录调控功能，抑或在病理条件下结合于只包含两个E-box的位点发挥转录调控作用。　　 本实验室近年来一直致力于LMO2可能参与的转录调控路径的研究，之前的研究工作中还发现并证实了LMO2基因具有两种蛋白产物：LMO2-L和LMO2-S，LMO2-S与LMO2-L一样，具备征性LIM结构域，但是两者在N端有14个氨基酸的不同，且在数目上LMO2-S比LMO2-L少了7个氨基酸，但是我们发现LMO2-S可以同LMO2-L一样结合LMO2复合体中的其它转录因子，但就与LDB1的结合能力而言，LMO2-S与它的结合力远低于LMO2-L。而对于不同的靶基因，LMO2-L与LMO2-也表现出不同的作用方式。在蛋白相互作用水平上，LMO2-L与LMO2-S对某些蛋白的功能影响也各不相同。本文便尝试探索LMO2-L、LMO2-S与GATA-1/2/3的结合能力的差异及与此相关的调控机制，并试图通过MBPpulldown筛选出未知的可能与LMo2-L/S存在相互作用的转录因子。现将已完成的工作报告如下：　　 1.融合蛋白MBP-LMO2-L/S的表达纯化构建表达融合蛋白MBP-LMO2-L/S的原核表达载体，经过IPTG的诱导，能够大量表达MBP-LMO2-L/S，使用amylose resin作为固相支持物，通过亲和层析、透析处理等方法，纯化MBP-LMO2-L/S，得到蛋白的浓缩液，并进一步通过考马斯亮蓝染色的方法鉴定融合蛋白的纯化效果。　　 2.转录因子GATA-1/2/3和LMO2-L/S之间相互作用的研究基于我们实验室之前的研究成果，认为GATA-1/2/3可能作为转录因子，参与到LMO2相关的基因表达调控路径。我们利用之前纯化的的融合蛋白，进行MBP pulldown实验，通过体外实验研究蛋白之间的相互作用。同时构建一系列真核表达载体，利用CheckMateTM Mammalian Two-Hybrid System，在体内实验中探究蛋白水平上GATA-1/2/3与LMO2-L/S之间可能存在的相互作用。