雌激素对人脐静脉血管内皮细胞内质网应激的凋亡影响

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第一部分雌激素对人脐静脉血管内皮细胞内质网应激的凋亡影响目的:绝经后早期(时间窗)开始激素补充治疗,能降低心血管疾病的发生。近年研究认为内质网应激反应在高血压心血管重塑中具有重要作用、并认为内质网应激是心血管疾病治疗的新的靶点。本研究通过建立衣霉素(TM)及二硫苏糖醇(DTT)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)内质网应激(ERS)凋亡模型,探讨17-β雌二醇(E2)对TM/DTT诱导HUVECs ERS凋亡的影响。方法:实验前期已确定10umol/L TM处理细胞10h或2mmol/L DTT处理细胞8h为诱导细胞ERS凋亡最佳浓度和时间。浓度为10-8mol/L的E2对ERS的保护作用最明显。根据是否用TM/DTT,E2,雌激素拮抗剂(ICI182,780和G15)处理进行如下分组:①空白对照组;②TM/DTT组;③TM/DTT+E2组;④TM/DTT+E2+ICI182,780组;⑤TM/DTT+E2+G15组;⑥TM/DTT+E2+ICI182,780+G15组。Western blot检测ERS诱导凋亡的标志分子GRP78、剪切的caspase 12及CHOP的表达,及Hochest染色检测凋亡细胞数的变化。结果:TM/DTT+E2组蛋白GRP78、剪切的caspase-12及CHOP的表达量较TM/DTT组显著降低,而TM/DTT+E2+ICI182,780+G15组其表达量显著上调。Hochest染色检测细胞凋亡数目的变化与Western blot的结果一致。结论:E2可以抑制TM/DTT诱导的人脐静脉内皮细胞内质网应激引起的凋亡,并通过加入E2拮抗剂反面论证了E2作用,为雌激素通过调节雌激素受体保持ERS的稳态,进而保护心血管的机制提供了新的见解。第二部分血液病清髓性化疗后卵巢早衰患者的围绝经期症状研究目的:了解女性血液病清髓性化疗后卵巢早衰患者性激素治疗(hormone therapy,HT)前后围绝经期症状的发生情况及自我认知。方法:2011年12月至2013年12月,就诊于北京大学人民医院妇科门诊的女性血液病清髓性化疗造血干细胞移植术后符合诊断标准的卵巢早衰患者142例。问卷形式调查其月经情况、性激素水平、围绝经期症状并评估激素治疗后围绝经期症状缓解特点。结果:1 142例患者中103人填写了改良的Kupperman评分表,82人出现了围绝经期症状,占79.6%,Kupperman绝经指数评分(KMI)平均为13.50分,96人填写了焦虑/抑郁(HAD)评分量表,6人出现焦虑,平均为8.83分,4人出现抑郁,平均为8.33分。2 105例接受了激素类药物治疗(94.6%),随访95例接受HT治疗患者中71人有规律撤退性出血。51人诉月经量明显少于移植前月经量,且经血颜色变暗,有统计学意义。3周期性激素治疗后KMI总分平均为6.7,且下降有统计学意义。结论:1血液疾病清髓性化疗剂量可导致卵巢功能提早衰竭。2性激素治疗也可以缓解清髓化疗后患者出现的围绝经期症状。3血液疾病清髓化疗后卵巢早衰患者对围绝经期症状的认知缺乏。
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