背景及目的:牙髓组织位于牙本质包绕形成的髓腔内,具有形成牙本质和抵御病原微生物入侵的功能。细菌及其毒素产物的入侵既可以引起牙髓炎症反应,也可以激发牙髓组织的修复反应。牙髓炎症是牙髓组织修复的先决条件,牙髓炎症的严重程度直接影响到牙髓组织的修复与愈合。轻微的炎症或者及时去除感染源,可以促进修复和愈合;持续的炎症将导致修复能力减弱甚至引起感染坏死。然而,牙髓的炎症反应与炎症刺激后的牙髓修复反应的机制尚不完全清楚。YAP是一种转录共激活因子,是Hippo信号通路的效应分子,参与调节多种细胞的炎症反应及矿化过程。研究表明,YAP参与了受到炎症刺激后的成牙骨质细胞矿化过程。但YAP是否参与牙髓炎症过程及炎症刺激后的牙髓细胞的矿化过程尚不清楚。因此,本实验拟探究YAP是否参与牙髓炎症及其炎症后的修复过程。方法:暴露大鼠右侧上、下颌第一磨牙髓腔建立大鼠牙髓炎症模型;收取健康牙齿和牙髓炎症状患牙的牙髓组织。然后将组织固定、脱水、包埋、切片,免疫组织化学染色检测牙髓炎组和对照组中YAP的表达。提取牙髓原代细胞,3-5代用作实验。用10 ng/m L TNF-α诱导牙髓细胞的炎症反应。q PCR检测m RNA的表达,Western blot检测蛋白的表达。用茜素红S染色检测TNF-α处理不同时间对牙髓细胞矿化的影响。结果:1.免疫组织化学染色结果发现,与正常牙髓组织相比,大鼠和人的牙髓炎组织中YAP的表达明显上调。2.TNF-α刺激牙髓细胞上调了YAP m RNA和YAP蛋白的表达3.茜素红S染色结果显示,TNF-α预处理0.5小时显著地促进了牙髓细胞的矿化,而TNF-α预处理3小时和TNF-α持续刺激牙髓细胞则是抑制了牙髓细胞的矿化。4.Western blot结果显示,与空白对照组相比,矿化诱导液组中牙髓细胞的YAP表达上调。与矿化诱导液组相比,TNF-α预处理0.5小时抑制了YAP的表达;然而,与TNF-α预处理0.5小时相比,TNF-α预处理3小时和TNF-α的持续刺激上调了牙髓细胞YAP的表达。结论:1.YAP参与了牙髓细胞的炎症反应和矿化过程。2.短时间的TNF-α刺激促进了牙髓细胞的矿化,长时间的TNF-α刺激抑制了牙髓细胞的矿化。3.YAP参与了正常条件下牙髓细胞的矿化过程和TNF-α刺激调节的牙髓细胞的矿化过程。