【摘 要】
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随着抗菌药物的大量、长期、不规范的使用,导致临床上耐药病原菌不断增多,细菌耐药性问题已经成为困扰医学界的一大难题。人乳中溶菌酶的抗菌活性是牛乳溶菌酶的300倍[54],是
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随着抗菌药物的大量、长期、不规范的使用,导致临床上耐药病原菌不断增多,细菌耐药性问题已经成为困扰医学界的一大难题。人乳中溶菌酶的抗菌活性是牛乳溶菌酶的300倍[54],是人乳区别于牛乳最重要的免疫因子。为了基因工程制备人溶菌酶,开发新型抗菌药物,本研究根据GenBank中收录的人溶菌酶基因（NC000012.10）设计引物,从人胎盘组织总RNA中扩增到一个人溶菌酶基因hLYZ,并利用分子生物学软件对其序列进行分析,结果表明,此溶菌酶基因为一个有效的人溶菌酶基因。构建了此基因的真核表达载体,在毕赤酵母菌中诱导表达。筛选出能够表达较高抗菌活性的基因工程重组人溶菌酶酵母菌株,收集表达产物进行体外抗菌活性检测,结果表明:重组人溶菌酶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌均有抗菌活性。构建了此基因的体内表达载体,在小鼠乳腺中表达,采集小鼠乳腺机乳汁进行体外抗菌活性检测结果表明:对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌表现出一定的抑菌作用。
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