哺乳动物克隆中的DNA甲基化变化

来源 :中国科学院动物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangjm
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本文为了解DNA甲基化的机制以及DNA甲基化变化与克隆低效率间的关系,我们设计了试验。   本文检测了兔体内胚胎及同种克隆胚胎中的DNA甲基化变化。我们用偏重亚硫酸盐方法检测了一个卫星DNA序列与一个单拷贝基因启动子区的甲基化状态。发现兔体内囊胚的内细胞团和滋养层间存在甲基化差异,而且克隆囊胚可以维持这种甲基化不平衡。我们的结果表明单拷贝基因序列同卫星DNA序列一样在克隆胚胎中都有着异常的甲基化变化。   本文分别构建了猪-兔和兔-猪异种克隆胚胎,并检测了供体基因组重复序列在胚胎发育过程中的甲基化状况。我们发现猪基因组重复序列在猪-兔异种胚胎中维持供体细胞核类型的高甲基化状态,而所检测的两个兔基因组的重复序列在兔-猪异种克隆胚胎中有明显的去甲基化。我们的结果表明克隆胚胎中重复序列去甲基化的能力主要由卵胞质决定。   本试验系统检测了同种克隆植入前胚胎、异种克隆植入前胚胎、以及克隆胎儿及成体中的DNA甲基化变化,表明异常的DNA甲基化在胚胎植入前期和植入后期都是导致克隆失败的重要原因。我们的结果对了解哺乳动物DNA甲基化变化机制以及提高克隆效率具有重要意义。
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