肠道树突状细胞在多器官功能障碍综合征中作用的研究

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目的观察小鼠肠道间质树突状细胞在多器官功能障碍综合征中的形态,数量和分布,检测肠道DC功能相关的表面分子和趋化因子受体-7在MODS病程中的变化规律与意义。探讨肠道DC在免疫紊乱,过度炎症反应及脏器损伤机制中的影响与作用,为MODS免疫病理学机制与防治研究提供新的依据。方法腹腔注射酵母多糖复制C57BL/6小鼠MODS模型,实验小鼠分为:正常对照组、3-6小时组、12-48小时组、5-7日组、10-12日组。光镜与电镜观察MODS各期小鼠肠道树突状细胞的形态、数量和分布的变化规律。运用免疫组织化学方法检测肠道树突状细胞表面标记物CD11_c、MHC-Ⅱ分子和CCR7的表达情况,流式细胞术检测MODS各期外周血CD4+T细胞与CD8+T细胞的数量与比值,外周血单核细胞对MHC-Ⅱ分子表达的变化。结果肠道树突状细胞广泛分布于正常小鼠肠道中,但数量极少,大部分处于非成熟状态,低表达MHC-Ⅱ分子。致伤早期(3-6小时)肠道节段性出血,肠黏膜增宽、水肿明显。肠道DC数量显著增生,对MHC-Ⅱ分子的表达轻度增加。外周血中MHC-Ⅱ阳性的单核细胞与CD4+T细胞数均减少,CD4+/CD8+比值降低。趋化因子受体CCR7表达水平较正常组轻度升高;急性损伤期(12-48小时)肠道节段性出血有所好转,肠黏膜及黏膜下层水肿减轻。DC数量略低于致伤早期,MHC-Ⅱ阳性细胞数显著上升。外周血中MHC-Ⅱ阳性的单核细胞与CD4+T细胞数显著减少,CD4+/CD8+比值明显降低。CCR7表达明显高于正常组;缓解期(5-7日),肠道病理变化明显减轻,DC数量仍高于正常组,但其功能与活性降低并趋于正常水平。外周血中MHC-Ⅱ阳性的单核细胞与CD4+T细胞数均有增加,CD4+/CD8+比值回升。而CCR7开始下降;MODS期(10-12日)肠道病理改变严重,功能处于衰竭状态。肠道DC再一次高度增生,MHC-Ⅱ表达显著下降。外周血中MHC-Ⅱ阳性的单核细胞下降至最低点,CD4+T细胞数也明显减少,CD4+/CD8+比值明显降低,CCR7水平明显下降并低于正常组。结论1肠道树突状细胞在小鼠MODS模型各时期中数量及活性的变化与脏器功能和结构的病理变化存在着密切关系,肠道树突状细胞参与了MODS病程中的免疫失衡。2 CCR7可能是影响MODS小鼠肠道树突状细胞迁移活性和免疫功能的一个重要因素。MODS病程中肠道DC CCR7表达水平可以作为评估其迁移活性和机体免疫应答水平的一个指标。
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