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目的:神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是婴幼儿及儿童时期具有高度恶性的第二常见实体瘤,占儿科恶性肿瘤的6%~8%。S100A8和S100A9是钙结合蛋白S100家族中两个重要的成员,二者与多种肿瘤的发生和发展有密切的关系。但是它们对神经母细胞瘤细胞系的作用及机制却少有研究。本文探究了S100A8和S100A9对神经母细胞瘤细胞增殖、迁移的作用及其生物学作用机制。方法:通过生物信息学分析得到S100A8和S100A9是与神经母瘤的发生发展有密切相关性的两个蛋白。通过构建携带绿色荧光蛋白标记的重组质粒,过表达组:S100A8-SBI-piggbac、S100A9-SBI-piggbac;低表达组:shRNA-S100A8(shS100A8或shA8)、shRNA-S100A9(shS100A9或shA9),将携带目的基因的重组质粒及其载体质粒转染到神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中,得到高表达S100A8、S100A9和低表达S100A8、S100A9的稳定细胞系;通过平板克隆实验和MTT实验,检测实验组细胞和对照组细胞的增殖能力,测定细胞活力;采用划痕实验、Transwell,检测细胞迁移能力的变化。用腺病毒介导的RFP、GFP、Siβ-catenin以及β-catenin分别处理SH-SY5Y及其稳定细胞系,通过划痕实验检测细胞的迁移能力的变化;平板克隆实验检测实验组和对照组细胞活力及增殖能力的变化。结果:(1)MTT实验和集落形成测定实验表明,在NB细胞SH-SY5Y中,与对照组(69.333±6.11)相比,过表达S100A8(98±1.732)和S100A9(107±4.583)NB细胞的增殖能力明显被提高(t=23.81、14.62,P<0.01)。S100A8(37.333±2.081)和S100A9(37±1.732)在SH-SY5Y细胞中敲减后,细胞的增殖活力明显低于对照组(t=19.35、24.14,P<0.01)。(2)划痕实验和Transwell侵袭迁移实验的结果显示,与对照组(360±20.075)相比,S100A8(499.667±13.65)和S100A9(564.333±28.937)的过表达明显提高了细胞的迁移率和集落形成量(t=6.426、7.517,P<0.01);而敲减S100A8(284±39.837)和S100A9(284±39.837)后,NB细胞迁移率明显被抑制,集落的形成量明显降低(t=5.364、5.848,P<0.01)。(3)通过划痕实验、平板克隆等实验检测表明,与对照组(Blank-Ad-GFP,75.5±3.536)相比,β-catenin的过表达(91±2.828)使细胞的迁移速率和集落形成数量明显增加(t=5.091,P<0.05)而与对照组(Blank-Ad-RFP,66.5±4.95)相比β-catenin的敲减(57.5±3.536)使细胞的迁移速率和集落形成数量明显降低(t=4.841,P<0.05)。将S100A8-Siβ-catenin(71±1.414)与S100A8-AdRFP(88±4.242),S100A9-Siβ-catenin(69±4.242)与S100A9-AdRFP(90±2.828)相比较,发现β-catenin在NB细胞中的敲减会降低S100A8和S100A9诱导的SH-SY5Y细胞的迁移速率和集落形成量(t=5.376、5.824,P<0.05)。结论:(1)S100A8和S100A9的过表达对NB细胞的增殖和迁移有促进作用。(2)在NB细胞中,过表达S100A8和S100A9与过表达β-catenin的作用一致,都会促进NB细胞的增殖和迁移。(3)β-catenin的敲减可以部分消除过表达S100A8和S100A9诱导NB细胞增殖和迁移的能力,故而S100A8和S100A9与β-catenin具有密切的相关性。因此,可推测S100A8和S100A9可能通过调节细胞内β-catenin的水平,参与调节Wnt/β-catenin信号通路进而促进神经母细胞瘤的增殖和迁移。