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目的:Graves病（Graves’disease）除了累及甲状腺,还可以损害其他组织或器官,如引起Graves眼病（Graves ophthalmopathy,GO）,GO是一种相对罕见但毁容、致残的眼眶疾病。眼外肌和眼眶结缔组织发生免疫性炎症反应是GO的病理学特征,而这种炎症反应是由淋巴细胞、巨噬细胞浸润导致的。根据研究自身抗原、免疫细胞等均能引起该病发生,但我们并不了解其起病的机理。有充分的实验证实外泌体中的miRNA功能失调可以导致多种类型的自身免疫性疾病的发生及其发展。我们的研究旨在探讨GO患者血清外泌体的miRNA的差异性表达,为使用血清外泌体miRNA进行靶向治疗自身免疫性疾病提供了新的理论基础。并探讨硒干预轻中度Graves眼病的远期预后影响。方法:1.GO患者血清外泌体miRNA表达谱的差异性分析:收集Graves眼病患者6人的血清,提取外泌体,进行外泌体鉴定和外泌体miRNA的二代测序,预测靶基因。2.硒干预Graves眼病的远期预后影响分析:纳入于中国医科大学第一临床学院就诊的轻中度Graves眼病患者74人,进行双盲对照试验,予以硒治疗组和对照组患者分别每天口服硒酵母片（200μg）与等剂量安慰剂,6个月停药。分别在治疗前、治疗6个月时,停药5年时三个时间点对纳入患者进行评估,检测患者的甲功、TPOAb、TGAb、TRAb,检查眼部症状体征,评估患者眼部炎症活动度,严重程度,并对试验对象进行Graves眼病生活质量进行评分。应用SPSS23.0统计软件对数据进行分析。结果:1.GO患者血清外泌体miRNA的差异性表达:1)30个miRNAs在GO患者中表达与健康对照人群相比有显著差异（p<0.05）,其中过表达miRNAs18个,低表达miRNAs12个。2)GO富集的靶点主要在生物过程中的“信号转导”,细胞成分中的“细胞膜”,分子功能中的“蛋白结合”。将差异miRNA靶基因KEGG富集性分析,p值排序前3位的富集通路依次为“p53信号通路”、“HIF1信号传导途径”、“受泛素引导的蛋白降解过程”,“癌症通路”为基因计数最多的通路。3)我们预测的靶基因中有19个低表达基因,10个高表达基因,其中低表达基因CYP19A1、AIFM2和EIF1AY编码参与细胞凋亡或细胞周期下调的蛋白。AIFM2和UTY编码具有抗氧化活性的蛋白,PRDM1编码参与非淋巴器官T淋巴细胞建立的蛋白,DDX3Y编码在干扰素α和β通路中具有刺激作用的蛋白。ITIH5编码一种参与稳定细胞外基质的蛋白质。过表达基因中PAX9和FGF14,编码有利于细胞生长、增殖的蛋白,PLEKHA2编码一种参与脂质和纤维连接蛋白结合的蛋白,RNF144B编码一种参与凋亡抑制的蛋白。2.硒干预Graves眼病的远期预后影响分析:1)治疗6个月时,硒治疗组的磨砂感和结膜充血症状较对照组明显好转（p<0.05）,停药5年时两组患者眼部症状改善状况无明显差别。2)治疗6个月时,硒治疗组CAS评分,与治疗前相比较下降明显（p<0.05）;对照组CAS评分则没有较大变化,停药5年时,两组的CAS评分均有较大改善（p<0.05）。3)治疗6个月时,两组的突眼度均无明显改善,停药5年时,两组的眼球突眼程度对比治疗前均明显好转（p<0.05）。4)治疗6个月时,停药5年两组的眼睑裂与治疗前比无明显差异。5)治疗6个月时,硒治疗组视功能评分、社会心理评分、量表总分与治疗对比明显提升（p<0.05）,对照组三个分值较治疗前差异没有统计学意义,停药5年时,两组的三个分值对比治疗前均提升显著（p<0.05）。6)治疗6个月时,硒治疗组TRAb水平相对治疗前明显下降（p<0.05）,对照组TRAb水平较治疗前差异无统计学意义,停药5年时,两组的TRAb水平较治疗前均明显减低（p<0.05）。停药5年时两组的TRAb阳性率无显著差异。7)两组停药5年时较治疗前有更高的TPOAb或TGAb阳性率（p<0.05）。8)停药5年时甲功正常患者比甲功异常患者的好转更显著（p<0.05）,TRAb阴性患者比TRAb阳性患者的好转更显著（p<0.05）。结论:1.GO患者血清外泌体miRNA表达谱的差异性分析:过表达miRNAs18个,低表达miRNAs12个。将差异miRNA靶基因KEGG富集性分析,p值排序前3位的富集通路依次为“p53信号通路”、“HIF1信号传导途径”、“受泛素引导的蛋白降解过程”,“癌症通路”为基因计数最多的通路。我们最终预测的29个靶基因中,CYP19A1、AIFM2、EIF1AY、AIFM2、UTY、PRDM1、DDX3Y、ITIH5、PAX9、FGF14、PLEKHA2、RNF144B可能在Graves眼病的发病中发挥了重要作用。2.硒干预Graves眼病的远期预后影响分析:与安慰剂对照组相比硒治疗6个月时显著改善眼病的活动度,眼部症状体征,以及眼病特异性生活质量。长期随访观察至停药5年时无论是否接受过硒治疗,GO炎症活动度,眼部症状体征,生活质量均明显好转,TRAb水平均显著下调,接受6个月硒干预对Graves眼病远期疗效和预后转归无影响。随访观察中发现甲功正常、TRAb阴性患者的预后改善比例显著高于甲功异常、TRAb阳性患者。